NY/T 4862-2025 麦类谷物及其制品烷基间苯二酚含量的测定 分光光度法

　　中华人民共和国农业行业标准

　　NY/T 4862—2025

　　麦类谷物及其制品烷基间苯二酚含量的测定 分光光度法

　　Determination of content of alkylresorcinol in triticeae cereals

　　and their products—Spectrophotometry

　　2025-12-09 发布

　　2026-05-01 实施

　　中华人民共和国农业农村部 发 布

　　前 言

　　本文件按照 GB/T 1 .1—2020« 标准化工作导则 第 1 部分 :标准化文件的结构和起草规则»的规定起草。

　　本文件由农业农村部乡村产业发展司提出。

　　本文件 由农业农村部农产品加工标准化技术委员会归 口 。

　　本文件起草单位 : 中国农业科学院农产品加工研究所 、江南大学 、北京工商大学 、国家粮食和物资储备局科学研究院 、内蒙古自治区质量和标准化研究院 、安徽中青检验检测有限公司 、佳木斯冬梅大豆食品有限公司 、深圳市深大检测有限公司。

　　本文件主要起草人 :刘丽娅 、王凤忠 、周素梅 、谭斌 、王立 、范蓓 、王媛媛 、董良杰 、曹荣 、蒋汶婷 、刘洁 、宋鑫 、佟立涛 、王丽丽 、李言 、郭雅红 、童亚男。

　　麦类谷物及其制品烷基间苯二酚含量的测定 分光光度法

　　1 范围

　　本文件描述了分光光度法测定麦类谷物及其制品烷基间苯二酚含量的方法。

　　本文件适用于分光光度法测定麦类谷物及其制品烷基间苯二酚含量 ,尤其适用于测定含麸皮的麦类谷物及其制品烷基间苯二酚含量。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中 ,注日期的引用文件 ,

　　仅该日期对应的版 本 适 用 于 本 文 件 ; 不 注 日 期 的 引 用 文 件 , 其 最 新 版 本(包 括 所 有 的 修 改 单)适 用 于 本

　　文件。

　　GB/T 6682—2008 分析实验室用水规格和试验方法

　　3 术语和定义

　　本文件没有需要界定的术语和定义。

　　4 原理

　　烷基间苯二酚与重氮盐 FastBlue B在酸性甲醇中发生偶联反应形成紫红色衍生物 ,在 520 nm 波长

　　标准品 ,通过紫外分光光度计测量 520 nm 下的吸收光强度 ,制作标准曲线。 将试样在 520 nm 波长下测

　　得的吸光值与标准曲线比较 ,计算得到烷基间苯二酚含量。

　　5 材料与试剂

　　5 .1 通用说明

　　除非另 有 说 明 , 本 标 准 方 法 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯 , 实 验 用 水 为 蒸 馏 水 或 去 离 子 水 , 应 符 合 GB/T 6682—2008 中三级水的规定。

　　5 .2 试剂

　　5 .2 .1 甲醇 :色谱纯。

　　5 .2 .2 乙醇。

　　5 .2 .3 丙醇。

　　5 .2 .4 乙酸乙酯。

　　5 .2 .5 乙酸水溶液 : 体积分数为 1% 。

　　5 .2 .6 重氮盐 fastblue BZn(4一苯甲酰氨基一2 ,5一二甲氧基氯化重氮苯氯化锌盐) :纯度 ≥95% 。

　　5 .2 .7 烷基间苯二酚同系物 5一十五烷间苯二酚(C15 :0)标准品 :纯度 ≥98% 。

　　5 .3 溶液配制

　　5 .3 .1 烷基间苯二酚标准储备液 :称取 10 mg(精确至 0 .000 1g)烷基间苯二酚同系物 C15 ∶ 0 标准品(纯度 98%) ,加入甲醇溶解并定 容 至 10 mL, 计 算 其 浓 度(μg/mL) , 在 4 ℃保 存 , 使 用 时 存 放 时 间 不 超 过14 d。

　　5 .3 .2 乙酸水溶液 :取 1 mL 无水乙酸 ,采用去离子水稀释至 100 mL。

　　5 .3 .3 重氮盐 fastblueBZn 储备液 :称取 0 .05 g(精确至 0 .000 1g)的重氮盐溶解于 100 mL 1%的乙酸溶液中。 在 4 ℃保存 ,使用时存放时间不超过 7 d。

　　1

　　5 .3 .4 重氮盐 fastblue BZn工作液 :重氮盐储备液 ∶ 甲醇= 1 ∶ 5 (V/V) ,重氮盐工作液需现配现用 .

　　5 .4 仪器

　　5 .4 .1 紫外可见分光光度计 :波长精度 ±2 nm.

　　5 .4 .2 实验室超声波清洗仪 :工作功率 ≥ 100 W ,频率 ≥ 25 Hz,可控温 .

　　5 .4 .3 离心机 :转速不低于 4 000 g.

　　5 .4 .4 谷物粉碎机 .

　　5 .4 .5 分析天平 :感量为 0 .000 1 g 和 0 .01 g.

　　5 .4 .6 旋转蒸发器 :配有水浴加热装置 .

　　5 .4 .7 氮吹仪 .

　　5 .4 .8 试验筛 :孔径 40 目 (0 .425 mm) .

　　5 .4 .9 微量加样枪 .

　　5 .4 .10 塑料离心管 .

　　5 .4 .1 1 旋蒸瓶 .

　　5 .4 .12 具塞玻璃孵育瓶 :不小于 5 mL.

　　6 分析步骤

　　6 .1 试样制备与保存

　　对于固体样品直接采用谷物粉碎机粉碎至全部通过 40 目试验筛(对于全麦粉等可直接通过 40 目试验筛的粉体原料无需粉碎) ,混合均匀后储存于洁净密闭容器中 ,室温下保存备用 . 对于半固体或液体样品需要经过干燥预处理再进行粉碎 .

　　6 .2 超声提取

　　取 1 g(M ,精确至 0 .001 g)粉碎后的样品置于离心管中 ,加入 20 mL 乙酸乙酯 ,在 100 W 功率 、室温条件下超声提取 15 min后 , 于 3 500 g 下离心 10 min,离心结束后将上清液全部转移至旋蒸瓶中 ,在 50 ℃条件下旋蒸至干燥 ,残留物经 1 mL 甲醇充分溶解后备用 .

　　6 .3 标准曲线的绘制

　　精确吸取 1 μL,2 μL,3 μL,4 μL,5 μL, 6 μL,7 μL烷基间苯二酚同系物 C15 :0 标准储备液于玻璃孵育瓶中 ,氮气吹干溶剂后 ,加入 2 mL新鲜配制重氮盐工作液 ,混匀后室温放置在黑暗处 ,孵育 60 min, 以未加入标准储备液的重氮盐工作液为空白参比 ,测定 520 nm 波长下的吸光值 . 根据 5 .3 .1 中标准储备液的浓度 ,计算不同加样体积下烷基间苯二酚的绝对质量(μg) , 以吸光值为横坐标 ,烷基间苯二酚绝对量为纵坐标绘制标准曲线 ,计算回归方程 .

　　6 .4 样品检测

　　取 6 .2 中 10 μL~ 20 μL(V)备用提取液于玻璃孵育瓶中 ,氮气吹干溶剂后 ,加入 2 .0 mL新鲜配制的重氮盐工作液 ,混匀后室温放置在黑暗处 ,孵育 60 min, 以未加入提取液的重氮盐工作液为空白参比 ,测定 520 nm 波长下的吸光值 ,代入标准曲线得到烷基间苯二酚绝对质量(m) .

　　7 计算结果

　　试样中烷基间苯二酚的含量按公式(1)计算 .

　　C … … … … … … … … … … … … … … … … … (1)

　　式中 :

　　C — 试样中烷基间苯二酚含量的数值 ,单位为微克每克(μg/g) ;

　　m — 6 .4 中所加备用提取液中烷基间苯二酚绝对质量的数值 ,单位为微克(μg) ;

　　M— 6 .2 中试样质量的数值 ,单位为克(g) ;

　　V — 6 .4 中所加备用提取液体积的数值 ,单位为微升(μL)。

　　试验结果以平行测定结果的平均值计 ,计算结果保留小数点后 1 位数字。

　　8 精密度

　　在重复性条件下获得 2 次独立测定结果的绝对值差值不应超过算术平均值的 10% 。