NY/T 4871-2025 土壤中200种农药及其代谢物残留量的测定

　　中华人民共和国农业行业标准

　　NY/T 4871—2025

　　土壤中200种农药及其代谢物

　　残留量的测定

　　Determination of 200 pesticides and metabolites residues in soil

　　2025-12-09 发布

　　2026-05-01 实施

　　中华人民共和国农业农村部 发 布

　　前 言

　　本文件按照 GB/T 1 .1—2020« 标准化工作导则 第 1 部分 : 标准化文件的结构和起草规则»的规定起草 .

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利 . 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 .

　　本文件由农业农村部科学技术司提出 .

　　本文件由农业农村部农业资源环境标准化技术委员会归 口 .

　　本文件分为五个部分 :

　　— 第 1 部分 :土壤中 17 种有机磷类农药及其代谢物残留量的 F测定 气相色谱法 ;

　　— 第 2 部分 :土壤中 10 种有机氯类农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱法 ;

　　— 第 3 部分 :土壤中 7 种氨基甲酸酯类农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱 柱后衍生法 ;

　　— 第 4 部分 :土壤中 93 种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱 质谱联用法 ;

　　— 第 5 部分 :土壤中 147 种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱 质谱联用法 ;

　　本文件起草单位 :农业农村部环境保护科研监测所 .

　　本文件主要起草人 :贺泽英 、蒋治国 、王璐 、徐亚平 、刘潇威 、史小萌 、王策 、何沛侨 、张珊 、谷静 .

　　土壤中 200 种农药及其代谢物残留量的测定

　　第 1 部分 :土壤中 17 种有机磷类农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱法

　　1 范围

　　本部分规定了土壤中甲胺磷 、灭线磷 、硫线磷 、甲拌磷(包括甲拌磷 、甲拌磷砜和甲拌磷亚砜) 、氧乐果 、特丁硫磷 、二嗪磷 、乐果 、甲基毒死蜱 、毒死蜱 、水胺硫磷 、噻唑膦 、丙溴磷 、硫环磷 、三唑磷 、莎稗磷和亚胺硫磷 17 种有机磷类农药及代谢物(见附录 A)的气相色谱检测方法。

　　本部分适用于土壤中上述 17 种农药及其代谢物残留量的测定。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中 ,注日期的引用文件 ,仅该日期对应的版 本 适 用 于 本 文 件 ; 不 注 日 期 的 引 用 文 件 , 其 最 新 版 本(包 括 所 有 的 修 改 单)适 用 于 本文件。

　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

　　NY/T52 土壤水分测定法

　　NY/T 395 农田土壤环境质量监测技术规范

　　3 原理

　　试样中有机磷类农药用乙腈提取 ,提取溶液经净化 、浓缩后 ,用丙酮定容 ,农药组分经毛细管色谱柱分离 ,火焰光度检测器(磷滤光片)检测。 保留时间定性 ,外标法定量。

　　4 试剂与材料

　　除另有说明外 ,均使用分析纯试剂 ,水为 GB/T 6682 规定的一级水。

　　4 .1 试剂

　　4 .1 .1 乙腈(CH3 CN ,CAS号 :75__05__8) 。

　　4 .1 .2 丙酮(C3 H6 O,CAS号 :67__64__1) ,色谱纯。

　　4 .1 .3 氯化钠(NaCl,CAS号 :7647__14__5) 。

　　4 .1 .4 无水硫酸镁(MgSO4 ,CAS号 :7487__88__9) 。

　　4 .1 .5 柠檬酸钠二水合物(C6 H5 Na3 O7 . 2H2 O,CAS号 :6132__04__3) 。

　　4 .1 .6 柠檬酸二钠盐倍半水合物(C6 H6 Na2 O7 . 1 .5H2 O,CAS号 :6132__05__4) 。

　　4 .2 标准品

　　17 种有机磷类农药及其代谢物标准品 ,见附录 A,纯度 ≥95% 。

　　4 .3 标准溶液配制

　　4 .3 .1 标准储备溶液(1 000 mg/L) :准确称取约 10 mg(精确至 0 .1 mg)有机磷类农药及其代谢物标准品 ,用丙酮溶解并分别定容至 10 mL,避光- 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 1 年 。

　　4 .3 .2 混合标准储备溶液(50 mg/L) : 吸取一定量的农药标准储备溶液于容量瓶中 ,用丙酮定容至刻度 ,避光- 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 6 个月。

　　4 .3 .3 混合标准溶液(5 mg/L) : 吸取一定量的混合标准储备溶液于容量瓶中 ,用丙酮定容至刻度 ,避光- 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 1 个月。

　　4 .4 材料

　　4 .4 .1 陶瓷均质子 :2 cm(长) × 1 cm(外径) ,或相当者。

　　4 .4 .2 十八烷基硅烷键合硅胶(C18) :粒径 40 μm~ 60 μm.

　　4 .4 .3 乙二胺G NG丙基硅烷化硅胶(PSA) :粒径 40 μm~ 60 μm.

　　4 .4 .4 微孔滤膜(有机相) :13 mm×0 .22 μm ,或相当者 .

　　5 仪器设备

　　5 .1 气相色谱仪 :配有火焰光度检测器(磷滤光片) ,分流/不分流进样 口 .

　　5 .2 分析天平 :感量 0 .1 mg和 0 .01 g.

　　5 .3 离心机 :转速不低于 4 000 r/min.

　　5 .4 涡旋混合器 .

　　5 .5 氮吹仪 :可控温 .

　　6 分析步骤

　　6 .1 试样制备与储存

　　按照 NY/T 395 的要求采集新鲜土壤样品 ,去除石子 、植物根茎等杂质后混合均匀 ,不风干 ,放入聚乙

　　或袋中 . 将样品按照测试和备用分别存放 ,于 - 20 ℃及以下条件保存 . 按照 NY/T 52 测定样品含

　　6 .2 提取和净化

　　称取 5 g试样(精确至 0 .01 g)于 50 mL塑料离心管中 ,加入 10 mL水涡旋混合均匀 ,静置 30 min.加入 10 mL乙腈及 1 颗陶瓷均质子 ,涡旋振荡 3 min后 ,加入提取盐包(4 g 无水硫酸镁 、1 g 氯化钠 、1 g柠檬酸钠二水合物 、0 .5 g柠檬酸二钠盐倍半水合物) ,涡旋振荡 1 min后 ,4 000 r/min离心 5 min. 吸取6 mL上清 液 加 到 内 含 900 mg 硫 酸 镁 、150 mg C18 和 150 mg PSA 的 15 mL 塑 料 离 心 管 中 , 涡 旋 混 匀1 min. 4 000 r/min离心 5 min,准确吸取 4 mL上清液于 10 mL试管中 ,40 ℃水浴中氮气吹至近干 . 加入 1 mL丙酮复溶 ,过微孔滤膜 ,用于测定 .

　　6 .3 测定

　　6 .3 .1 仪器参考条件

　　a) 色谱柱 :50%聚苯基甲基硅氧烷石英毛细管柱 ,30 m×0 .53 mm(内径) ×1 .0μm ,或相当者 ;

　　b) 色谱柱温 度 : 150 ℃保 持 2 min, 然 后 以 8 ℃/min程 序 升 温 至 210 ℃ , 再 以 5 ℃/min升 温 至

　　250 ℃ ,保持 15 min;

　　c) 载气 :氮气 ,纯度 ≥99 .999% ,流速为 8 .4 mL/min;

　　d) 进样口温度 :250 ℃ ;

　　e) 检测器温度 :300 ℃ ;

　　f) 进样量 :1 μL;

　　g) 进样方式 :不分流进样 ;

　　h) 吹扫时间 :0 .75 min;

　　i) 燃气 :氢气 ,纯度 ≥99 .999% ,流速为 80 mL/min.

　　j) 助燃气 :空气 ,流速为 110 mL/min.

　　6 .3 .2 基质匹配标准工作曲线

　　空白土壤样品按照 6 .2 进行前处理 ,得到空白基质溶液 . 准确吸取一定量的混合标准溶液 ,逐级用丙酮释成质量浓度为 0 .01 mg/L、0 .02 mg/L、0 .05 mg/L、0 .1 mg/L和 0 .5 mg/L的系列标准工作溶液 .取 4 mL空白基质溶液氮气至近干 ,分别加入 1 mL上述标准工作溶液复溶 ,过微孔滤膜配制成系列基质混合标准工作溶液 ,参考色谱条件测定 . 以农药色谱峰面积为纵坐标 、相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标 ,绘制基质匹配标准工作曲线 .

　　6 .3 .3 定性及定量

　　6 .3 .3 .1 定性测定

　　以目标农药的保留时间定性 . 试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较 .本方法 17 种有机磷农药及其代谢物标准溶液的色谱图见附录 B.

　　6 .3 .3 .2 定量测定

　　外标法定量 .

　　6 .3 .4 试样溶液的测定

　　将系列基质匹配混合标准工作溶液和试样溶液依次注入气相色谱仪中 ,保留时间定性 ,测得目标农药色谱峰面积 ,待测试样溶液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内 ,超过线性范围时应稀释到线性范围内后再进行分析 .

　　6 .4 平行测定

　　按以上步骤对同一试样进行 2 次平行试验测定 .

　　6 .5 空白试验

　　除不加试料外 ,按照 6 .2 ~ 6 .4 的规定进行平行操作 .

　　7 结果计算

　　试样中被测农药残 留 量 以 质 量 分 数 ω 计 , 单 位 以 毫 克 每 千 克(mg/kg)表 示 , 按 公 式 (1)或 公 式 (2)计算 .

　　式中 :

　　ρ1 — 基质匹配标准工作溶液中农药质量浓度的数值 ,单位为毫克每升(mg/L) ;

　　ρ2 — 从基质匹配标准工作曲线中得到的试样溶液中农药质量浓度的数值 ,单位为毫克每升(mg/L) ; A — 样品溶液中被测农药的峰面积 ;

　　AS — 基质匹配标准工作溶液中被测农药的峰面积 ;

　　V1 — 提取溶剂总体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　V2 — 分取的提取溶液体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　V3 — 样品溶液定容体积 ,单位为毫升(mL) ;

　　m — 新鲜土壤试样质量的数值 ,单位为克(g) ;

　　θm — 新鲜土壤试样的质量含水量 .

　　计算结果保留 2 位有效数字 . 当含量超 1 mg/kg时 ,保留 3 位有效数字 .

　　8 精密度

　　在重复性条件下 ,获得的 2 次独立测试结果的绝对差值不得超过重复性限(r) ,见附录 C.

　　在再现性条件下 ,获得的 2 次独立测试结果的绝对差值不得超过再现性限(R) ,见附录 C.

　　9 其他

　　本文件方法定量限为 0 .01 mg/kg(见附录 A) .

　　附 录 A

　　(规范性)

　　17 种有机磷类农药及其代谢物中英文名称、分子式、CAS号和方法定量限

　　17 种有机磷类农药及其代谢物中英文名称 、分子式 、CAS号和方法定量限 ,见表 A.1 。

　　表 A.1 17 种有机磷类农药及其代谢物中英文名称、分子式、CAS号和方法定量限

　　附 录 B

　　(资料性)

　　17 种有机磷类农药及其代谢物标准溶液的色谱图

　　17 种有机磷类农药及其代谢物标准溶液的色谱图见图 B.1 。

　　标引序号说明 :

　　1 — 甲胺磷 ; 9 — 甲基毒死蜱 ;

　　2 — 灭线磷 ; 10 — 毒死蜱 ;

　　3 — 硫线磷 ; 11 — 水胺硫磷 ; 4__1 — 甲拌磷 ; 12 — 噻唑膦 ;

　　4__2 — 甲拌磷砜 ; 13 — 丙溴磷 ; 4__3 — 甲拌磷亚砜 ; 14 — 硫环磷 ;

　　5 — 氧乐果 ; 15 — 三唑磷 ;

　　6 — 特丁硫磷 ; 16 — 莎稗磷 ;

　　7 — 二嗪磷 ; 17 — 亚胺硫磷 ;

　　8 — 乐果 ;

　　图 B.1 17 种有机磷类农药及其代谢物标准溶液的色谱图

　　附 录 C

　　(资料性)

　　17 种有机磷类农药精密度数据

　　重复性限(r)要求见表 C.1 ,再现性(R)要求见表 C.2 。

　　表 C.1 17 种有机磷农药及其代谢物的重复性限(r)

　　表 C.2 17 种有机磷农药及其代谢物的再现性限(R)

　　表 C.2 (续)

　　土壤中 200 种农药及其代谢物残留量的测定

　　第 2 部分 :土壤中 10 种有机氯类农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱法

　　1 范围

　　本部分规定了土壤中六六六(包括 α_六六六 、β_六六六 、γ_六六六 、δ_六六六) 、滴滴涕(包括 2 ,4 ’_滴滴滴 、4 ,4 ’_滴滴滴 、2 ,4 ’_滴滴伊 、4 ,4 ’_滴滴伊 、2 ,4 ’_滴滴涕 、4 ,4 ’_滴滴涕) 、六氯苯 、五氯硝基苯 、百菌清 、乙草胺 、艾氏剂 、硫丹(包括 α_硫丹 、β_硫丹) 、丁草胺和三氯杀螨醇 10 种有机氯类农药及其代谢物(见附录A)多残留气相色谱检测方法。

　　本部分适用于土壤中上述 10 种农药及其代谢物残留量的测定。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中 ,注日期的引用文件 ,仅该日期对应的版 本 适 用 于 本 文 件 ; 不 注 日 期 的 引 用 文 件 , 其 最 新 版 本(包 括 所 有 的 修 改 单)适 用 于 本文件。

　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

　　NY/T52 土壤水分测定法

　　NY/T 395 农田土壤环境质量监测技术规范

　　3 原理

　　试样中有机氯类农药用乙腈提取 ,提取溶液经净化 、浓缩后 ,农药组分经毛细管色谱柱分离 , 电子捕获检测器(ECD)检测。 保留时间定性 ,外标法定量。

　　4 试剂与材料

　　除另有说明外 ,均使用分析纯试剂 ,水为 GB/T 6682 规定的一级水。

　　4 .1 试剂

　　4 .1 .1 乙腈(CH3 CN ,CAS号 :75__05__8) 。

　　4 .1 .2 丙酮(C3 H6 O,CAS号 :67__64__1) ,色谱纯。

　　4 .1 .3 正己烷(C6 H14 ,CAS号 :110__54__3) ,色谱纯。

　　4 .1 .4 氯化钠(NaCl,CAS号 :7647__14__5) 。

　　4 .1 .5 无水硫酸镁(MgSO4 ,CAS号 :7487__88__9) 。

　　4 .1 .6 柠檬酸钠二水合物(C6 H5 Na3 O7 . 2H2 O,CAS号 :6132__04__3) 。

　　4 .1 .7 柠檬酸二钠盐倍半水合物(C6 H6 Na2 O7 . 1 .5H2 O,CAS号 :6132__05__4) 。

　　4 .2 溶液配制

　　丙酮 正己烷溶液(10+90) :量取 10 mL丙酮加入 90 mL正己烷中 ,混匀。

　　4 .3 标准品

　　10 种有机氯类农药及其代谢物标准品 ,见附录 A,纯度 ≥95% 。

　　4 .4 标准溶液配制

　　4 .4 .1 标准储备溶液(1 000 mg/L) :准确称取约 10 mg(精确至 0 .1 mg)有机氯类农药及其代谢物标准品 ,用正己烷溶解并分别定容至 10 mL,避光- 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 1 年 。

　　4 .4 .2 混合标准储备溶液(50 mg/L) : 吸取一定量的农药标准储备溶液于容量瓶中 ,用正己烷定容至刻

　　4 .4 .3 混合标准溶液(5 mg/L) : 吸取一定量的混合标准储备溶液于容量瓶中 ,用正己烷定容至刻度 ,避光 - 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 1 个月 .

　　4 .5 材料

　　4 .5 .1 陶瓷均质子 :2 cm(长) × 1 cm(外径) ,或相当者 .

　　4 .5 .2 固相萃取柱 :弗罗里硅土柱 ,1 000 mg,容积 6 mL.

　　4 .5 .3 微孔滤膜(有机相) :13 mm×0 .22 μm ,或相当者 .

　　5 仪器设备

　　5 .1 气相色谱仪 :配有电子捕获检测器(ECD) ,分流/不分流进样 口 .

　　5 .2 分析天平 :感量 0 .1 mg和 0 .01 g.

　　5 .3 离心机 :转速不低于 4 000 r/min.

　　5 .4 涡旋混合器 .

　　5 .5 旋转蒸发仪 :可控温 .

　　5 .6 氮吹仪 :可控温 .

　　6 分析步骤

　　6 .1 试样制备与储存

　　按照 NY/T 395 的要求采集新鲜土壤样品 ,去除石子 、植物根茎等杂质后混合均匀 ,不风干 ,放入聚乙

　　烯瓶或袋中 . 将样品按照测试和备用分别存放 ,于 - 20 ℃及以下条件保存 . 按照 NY/T 52 测定样品含

　　6 .2 提取

　　称取 5 g试样(精确至 0 .01 g)于 50 mL塑料离心管中 ,加入 10 mL水涡旋混合均匀 ,静置 30 min.

　　加入 10 mL乙腈及 1 颗陶瓷均质子 ,涡旋振荡 3 min后 ,加入提取盐包(4 g 无水硫酸镁 、1 g 氯化钠 、1 g柠檬酸钠二水合物 、0 .5 g柠檬酸二钠盐倍半水合物) ,涡旋振荡 1 min后 ,4 000 r/min离心 5 min. 准确吸取 4 mL上清液于 100 mL鸡心瓶中 ,40 ℃水浴旋转蒸发至近干 ,加入 2 .0 mL正己烷 ,待净化 .

　　6 .3 净化

　　将弗罗里硅土柱依次用 5 .0 mL丙酮 正己烷溶液(4 .2) 、5 .0 mL正已烷预淋洗 ,弃去淋洗液 . 当溶剂液面到达上层筛板表面时 ,立即倒入上述待净化溶液 ,用 15 mL刻度试管接收洗脱液 ,用 5 mL丙酮 正已烷溶液(4 .2)冲洗鸡心瓶后淋洗弗罗里硅土柱 ,并重复 1 次 . 将盛有淋洗液的刻度离心管置于氮吹仪上 ,在水浴温度 40 ℃条件下 ,氮吹蒸发至低于 2 mL,加入正已烷定容至 2 mL,涡旋混匀 ,过微孔滤膜 ,用于测定 .

　　6 .4 测定

　　6 .4 .1 仪器参考条件

　　a) 色谱柱 :100%聚苯基甲基硅氧烷石英毛细管柱 ,30 m×0 .25 mm(内径) × 0 .25 μm ,或相当者 ;

　　b) 色谱柱温度 :100 ℃保持 2 min,然后以 6 ℃/min程序升温至 270 ℃ ,保持 8 min;

　　c) 进样口温度 :200 ℃ ;

　　d) 检测器温度 :300 ℃ ;

　　e) 进样量 :1 μL;

　　f) 进样方式 :分流进样 ,分流比 10 ∶ 1 .

　　g) 载气 :氮气 ,纯度 ≥99 .999% ,流速为 1 mL/min.

　　h) 辅助气 :氮气 ,纯度 ≥99 .999% ,流速为 60 mL/min.

　　6 .4 .2 标准工作曲线

　　将混合标 准 溶 液 用 正 己 烷 稀 释 成 质 量 浓 度 为 0 .01 mg/L、0 .02 mg/L、0 .05 mg/L、0 .1 mg/L 和

　　0 .5 mg/L的系列标准工作溶液 ,参考色谱条件测定 . 以农药色谱峰面积为纵坐标 、相对应的标准工作溶液质量浓度为横坐标 ,绘制标准工作曲线 .

　　6 .4 .3 定性及定量

　　6 .4 .3 .1 定性测定

　　以 目标农药的保留时间定性 . 试样中 目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较 ,相对误差应在 ±2 .5%之内 .

　　本方法 10 种有机氯类农药及其代谢物的色谱图见附录 B.

　　6 .4 .3 .2 定量测定

　　外标法定量 .

　　6 .4 .4 试样溶液的测定

　　将混合标准工作溶液和试样溶液依次注入气相色谱仪中 ,保留时间定性 ,测得目标农药色谱峰面积 ,待测试样溶液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内 ,超过线性范围时应稀释到线性范围内后再进行分析 .

　　6 .5 平行测定

　　按以上步骤对同一试样进行 2 次平行试验测定 .

　　6 .6 空白试验

　　除不加试料外 ,按照 6 .2 ~ 6 .5 的规定进行平行操作 .

　　7 结果计算

　　试样中被测农药残 留 量 以 质 量 分 数 ω 计 , 单 位 以 毫 克 每 千 克(mg/kg)表 示 , 按 公 式 (1)或 公 式 (2)计算 .

　　式中 :

　　ρ1 — 标准溶液中农药质量浓度的数值 ,单位为毫克每升(mg/L) ;

　　ρ2 — 从标准工作曲线中得到的试样溶液中农药质量浓度的数值 ,单位为毫克每升(mg/L) ;

　　A — 样品溶液中被测农药的峰面积 ;

　　AS — 农药标准溶液中被测农药的峰面积 ;

　　V1 — 提取溶剂总体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　V2 — 分取的提取溶液体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　V3 — 样品溶液定容体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　m — 新鲜土壤试样质量的数值 ,单位为克(g) ;

　　θm — 新鲜土壤试样的质量含水量 .

　　计算结果保留 2 位有效数字 . 当含量超 1 mg/kg时 ,保留 3 位有效数字 .

　　8 精密度

　　在重复性条件下 ,获得的 2 次独立测试结果的绝对差值不得超过重复性限(r) ,见附录 C.

　　在再现性条件下 ,获得的 2 次独立测试结果的绝对差值不得超过再现性限(R) ,见附录 C.

　　9 其他

　　本文件方法定量限为 0 .01 mg/kg(见附录 A) .

　　附 录 A

　　(规范性)

　　10 种有机氯类农药及其代谢物中英文名称、分子式、CAS号和方法定量限

　　10 种有机氯类农药及其代谢物中英文名称 、分子式 、CAS号和方法定量限 ,见表 A.1 。

　　表 A.1 10 种有机氯类农药及其代谢物中英文名称、分子式、CAS号和方法定量限

　　附 录 A

　　(资料性)

　　10 种有机氯类及其代谢物农药标准溶液的色谱图

　　10 种有机氯类及其代谢物农药标准溶液的色谱图见图 B.1 。

　　标引序号说明 :

　　1一1 — α一六六六 ; 7一2 — 4 ,4 /一滴滴伊 ;

　　1一2 — β一六六六 ; 7一3 — 2 ,4 /一滴滴滴 ;

　　1一3 — γ一六六六 ; 7一4 — 4 ,4 /一滴滴滴 ;

　　1一4— δ一六六六 ; 7一5 — 2 ,4 /一滴滴涕 ;

　　2 — 六氯苯 ; 7一6 — 4 ,4 /一滴滴涕 ;

　　3 — 五氯硝基苯 ; 8一1 — α一硫丹 ;

　　4 — 百菌清 ; 8一2 — β一硫丹 ;

　　5 — 乙草胺 ; 9 — 丁草胺 ;

　　6 — 艾氏剂 ; 10 — 三氯杀螨醇 ,前 4 ,4 /一三氯杀螨醇 ,后 2 ,4 /一三氯杀螨醇。 7一1 — 2 ,4 /一滴滴伊

　　图 B.1 10 种有机氯类及其代谢物农药标准溶液的色谱图

　　附 录 C

　　(资料性)

　　10 种有机氯农药及其代谢物精密度数据

　　重复性限(r)要求见表 C.1 ,再现性(R)要求见表 C.2 。

　　表 C.1 10 种有机氯农药及其代谢物的重复性限(r)

　　表 C.2 10 种有机氯农药及其代谢物的再现性限(R)

　　表 C.2 (续)

　　土壤中 200 种农药及其代谢物残留量的测定

　　第 3 部分 :土壤中 7 种氨基甲酸酯类农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱 柱后衍生法

　　1 范围

　　本部分规定了土壤中涕灭威(包括涕灭威 、涕灭威砜和涕灭威亚砜) 、克百威(包括克百威和 3__羟基克

　　百威) 、速灭威 、甲萘威 、异丙威 、仲丁威和灭多威 7 种氨基甲酸酯类农药(见附录 A)液相色谱检测方法。

　　本部分适用于土壤中上述 7 种农药及其代谢物残留量的测定。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中 ,注日期的引用文件 ,仅该日期对应的版本适用于本文件 ;不注 日期的引用文件 ,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 。

　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

　　NY/T52 土壤水分测定法

　　NY/T 395 农田土壤环境质量监测技术规范

　　3 原理

　　试样中氨基甲酸酯类农药用乙腈提取 ,提取溶液经净化 、浓缩后 ,农药组分使用带荧光检测器和柱后衍生系统的高效液相色谱进行检测。 保留时间定性 ,外标法定量。

　　4 试剂和材料

　　除非另有说明 ,在分析中仅使用分析纯的试剂 ,水为 GB/T 6682 规定的一级水。

　　4 .1 试剂

　　4 .1 .1 乙腈(CH3 CN ,CAS号 :75__05__8) 。

　　4 .1 .2 甲醇(CH3 OH ,CAS号 :67__56__1) ,色谱纯。

　　4 .1 .3 二氯甲烷(CH2 Cl2 ,CAS号 :75__09__2) ,色谱纯。

　　4 .1 .4 氯化钠(NaCl,CAS号 :7647__14__5) 。

　　4 .1 .5 无水硫酸镁(MgSO4 ,CAS号 :7487__88__9) 。

　　4 .1 .6 柠檬酸钠二水合物(C6 H5 Na3 O7 . 2H2 O,CAS号 :6132__04__3) 。

　　4 .1 .7 柠檬酸二钠盐倍半水合物(C6 H6 Na2 O7 . 1 .5H2 O,CAS号 :6132__05__4) 。

　　4 .1 .8 邻苯二甲醛(C8 H6 O2 ,CAS号 :643__79__8) 。

　　4 .1 .9 2__二甲胺基乙硫醇盐酸盐(C4 H12 ClNS,CAS号 :13242__44__9) 。

　　4 .1 .10 氢氧化钠(NaOH ,CAS号 :1310__73__2) 。

　　4 .1 .1 1 十水四硼酸钠(Na2 B4 O7 . 10H2 O,CAS号 :1303__96__4) 。

　　4 .2 溶液配制

　　4 .2 .1 氢氧化钠溶液(0 .05 mol/L) :称取 2 .0 g氢氧化钠 ,用水溶解并定容至 1 000 mL,混匀。

　　4 .2 .2 十水四 硼酸钠溶液(4 g/L) :称取 4 .0 g 十水四硼酸钠 ,用水溶解并定容至 1 000 mL,混匀。

　　4 .2 .3 甲醇 二氯甲烷溶液(1+99) :量取 1 mL 甲醇加入 99 mL二氯甲烷中 ,混匀。

　　4 .2 .4 邻苯二甲醛溶剂(OPA试剂) :称取 50 .0 mg邻苯二甲醛 ,溶于 5 mL 甲醇中 ,混匀 ;再称取 1 .0 g 2__二甲胺基乙硫醇盐酸盐 ,溶于 5 mL十水四硼酸钠溶液(4 .2 .2) ,混匀 ;将上述两种溶液倒入 490 mL 十

　　水四硼酸钠溶液(4 .2 .2) ,混匀 .

　　4 .3 标准品

　　7 种农药及其代谢物标准品 ,见附录 A,纯度 ≥95% .

　　4 .4 标准溶液配制

　　4 .4 .1 标准储备溶液(1 000 mg/L) :准确称取约 10 mg(精确至 0 .1 mg)各农药标准品 ,用甲醇溶解并分别定容至 10 mL. 避光- 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 1 年 .

　　4 .4 .2 混合标准储备溶液(50 mg/L) : 吸取一定量的农药标准储备溶液于容量瓶中 ,用甲醇定容至刻度 ,避光- 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 3 个月 .

　　4 .4 .3 混合标准溶液(5 mg/L) : 吸取一定量的混合标准储备溶液于容量瓶中 ,用甲醇定容至刻度 ,避光- 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 1 个月 .

　　4 .5 材料

　　4 .5 .1 陶瓷均质子 :2 cm(长) × 1 cm(外径) ,或相当者 .

　　4 .5 .2 固相萃取柱 :氨基柱 ,1 000 mg,容积 6 mL.

　　4 .5 .3 微孔滤膜(有机相) :13 mm×0 .22 μm ,或相当者 .

　　5 仪器设备

　　5 .1 液相色谱仪 :配有柱后衍生反应装置和荧光检测器(FLD) .

　　5 .2 分析天平 :感量 0 .1 mg和 0 .01 g.

　　5 .3 旋转蒸发仪 :可控温 .

　　5 .4 离心机 :转速不低于 4 000 r/min.

　　5 .5 氮吹仪 :可控温 .

　　5 .6 涡旋混合器 .

　　6 分析步骤

　　6 .1 试样制备与储存

　　按照 NY/T 395 的要求采集新鲜土壤样品 ,去除石子 、植物根茎等杂质后混合均匀 , 不风干 ,放入聚

　　或袋中 . 将样品按照测试和备用分别存放 , 于 - 20 ℃及以下条件保存 . 按照 NY/T 52 测定样品

　　6 .2 提取

　　称取 5 g试样(精确至 0 .01 g)于 50 mL塑料离心管中 ,加入 10 mL水涡旋混合均匀 ,静置 30 min.加入 10 mL乙腈及 1 颗陶瓷均质子(4 .5 .1) ,涡旋振荡 3 min后 ,加入提取盐包(4 g无水硫酸镁 、1 g氯化钠 、1 g柠檬酸钠二水合物 、0 .5 g柠檬酸二钠盐倍半水合物) ,涡旋振荡 1 min后 ,4 000 r/min离心 5 min.准确吸取 4 mL上清液于 100 mL鸡心瓶中 ,40 ℃水浴旋转蒸发至近干 ,加入 2 .0 mL 甲醇 二氯甲烷溶液(4 .2 .3)溶解残余物 ,待净化 .

　　6 .3 净化

　　将氨基柱(4 .5 .2)用 4 mL 甲醇 二氯甲烷溶液(4 .2 .3)预淋洗 , 当液面到达柱筛板顶部时 ,立即加入上述待净化溶液 ,用 10 mL离心管收集洗脱液 ,用 2 mL 甲醇 二氯甲烷溶液(4 .2 .3)涮洗鸡心瓶后过柱 ,并重复 1 次 ,收集的洗脱液于 40 ℃水浴中氮吹蒸发近干 ,准确加入 1 mL 甲醇 , 涡旋混匀 ,用微孔滤膜过滤 (4 .5 .3) ,用于测定 .

　　6 .4 测定

　　6 .4 .1 仪器参考条件

　　a) 色谱柱 :C18 柱 ,250 mm(柱长) × 4 .6 mm(内径) × 5 μm(粒径) ,或相当者 ;

　　b) 柱温 :40 ℃ ;

　　c) 流速 :1 mL/min;

　　d) 荧光检测器 :λex= 330 nm ,λem = 465 nm;

　　表 1 流动相及其梯度条件(VA+VB)

　　f) 柱后衍生 :0 .05 mol/L氢氧化钠溶液 ,流速 0 .3 mL/min; OPA试剂 , 流速 0 .3 mL/min;水解温度 ,100 ℃;衍生温度 ,室温 ;

　　g) 进样体积 :20 μL.

　　6 .4 .2 标准工作曲线

　　将混合标准溶液用甲醇稀释成质量浓度为 0 .02 mg/L、0 .05 mg/L、0 .1 mg/L、0 .5 mg/L和 1 mg/L的系列标准工作溶液 ,参考色谱条件测定 . 以农药色谱峰面积为纵坐标 、相对应的标准工作溶液质量浓度为横坐标 ,绘制标准工作曲线 .

　　6 .4 .3 定性及定量

　　6 .4 .3 .1 定性测定

　　以 目标农药的保留时间定性 . 试样中 目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较 ,相对误差应在 ±2 .5%之内 .

　　本方法 7 种氨基甲酸酯类农药及其代谢物的色谱图见附录 B.

　　6 .4 .3 .2 定量测定

　　外标法定量 .

　　6 .4 .4 试样溶液的测定

　　将混合标准工作溶液和试样溶液依次注入液相色谱仪中 ,保留时间定性 ,测得目标农药色谱峰面积 ,待测试样溶液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内 ,超过线性范围时应稀释到线性范围内后再进行分析 .

　　6 .5 平行测定

　　按以上步骤对同一试样进行 2 次平行试验测定 .

　　6 .6 空白试验

　　除不加试料外 ,按照 6 .2 ~ 6 .5 的规定进行平行操作 .

　　7 结果计算

　　试样中被测农药残 留 量 以 质 量 分 数 ⑴ 计 , 单 位 以 毫 克 每 千 克(mg/kg)表 示 , 按 公 式 (1)或 公 式 (2)

　　计算。

　　式中 :

　　ρ1 — 标准溶液中农药质量浓度的数值 ,单位为毫克每升(mg/L) ;

　　ρ2 — 从标准工作曲线中得到的试样溶液中农药质量浓度的数值 ,单位为毫克每升(mg/L) ;

　　A — 样品溶液中被测农药的峰面积 ;

　　AS — 标准溶液中被测农药的峰面积 ;

　　V1 — 提取溶剂总体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　V2 — 分取的提取溶液体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　V3 — 样品溶液定容体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　m — 新鲜土壤试样质量的数值 ,单位为克(g) ;

　　θm — 新鲜土壤试样的质量含水量。

　　计算结果保留 2 位有效数字。 当含量超 1 mg/kg时 ,保留 3 位有效数字。

　　8 精密度

　　在重复性条件下 ,获得的 2 次独立测试结果的绝对差值不得超过重复性限(r) ,见附录 C。

　　在再现性条件下 ,获得的 2 次独立测试结果的绝对差值不得超过再现性限(R) ,见附录 C。

　　9 其他

　　本文件方法定量限为 0 .01 mg/kg(见附录 A) 。

　　附 录 A

　　(规范性)

　　7 种氨基甲酸酯类农药及代谢物中英文名称、分子式、CAS号和方法定量限

　　7 种氨基甲酸酯类农药及代谢物中英文名称 、分子式 、CAS号和方法定量限 ,见表 A.1 .

　　表 A.1 7 种氨基甲酸酯类农药及代谢物中英文名称、分子式、CAS号和方法定量限

　　附 录 B

　　(资料性)

　　7 种氨基甲酸酯类农药及其代谢物标准溶液的色谱图

　　7 种氨基甲酸酯类农药及其代谢物标准溶液的色谱图见图 B.1 。

　　LU

　　14

　　12

　　10

　　8

　　6

　　4

　　2 1 -2

　　10 12 14

　　3 - 1

　　5

　　l -3

　　4

　　6

　　3 -2

　　20 22 24 t,min

　　标引序号说明 :

　　1__1 — 涕灭威亚砜 ; 3__2 — 克百威 ;

　　1__2 — 涕灭威砜 ; 4 — 速灭威 ;

　　1__3 — 涕灭威 ; 5 — 甲萘威 ;

　　2 — 灭多威 ; 6 — 异丙威 ;

　　3__1 — 3__羟基克百威 ; 7 — 仲丁威 ;

　　图 B.1 7 种氨基甲酸酯类农药及其代谢物标准溶液的色谱图

　　附 录 C

　　(资料性)

　　7 种氨基甲酸酯类农药及其代谢物精密度数据

　　重复性限(r)要求见表 C.1 ,再现性(R)要求见表 C.2 .

　　表 C.1 7 种氨基甲酸酯类农药及其代谢物的重复性限(r)

　　表 C.2 7 种氨基甲酸酯类农药及其代谢物的再现性限(R)

　　土壤中 200 种农药及其代谢物残留量的测定

　　第 4 部分 :土壤中 93 种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱 质谱联用法

　　1 范围

　　本部分规定了土壤中 93 种农药及其代谢物(见附录 A)的气相色谱 质谱联用检测方法。

　　本部分适用于土壤中上述 93 种农药及其代谢物残留量的测定。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中 ,注日期的引用文件 ,仅该日期对应的版 本 适 用 于 本 文 件 ; 不 注 日 期 的 引 用 文 件 , 其 最 新 版 本(包 括 所 有 的 修 改 单)适 用 于 本文件。

　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

　　NY/T52 土壤水分测定法

　　NY/T 395 农田土壤环境质量监测技术规范

　　3 原理

　　试样中农药用乙腈提取 ,提取液经分散固相萃取净化 ,气相色谱 质谱联用仪检测 , 内标法或外标法定量。

　　4 试剂与材料

　　除另有说明外 ,均使用分析纯试剂 ,水为 GB/T 6682 规定的一级水。

　　4 .1 试剂

　　4 .1 .1 乙腈(CH3 CN ,CAS号 :75__05__8) 。

　　4 .1 .2 乙酸乙酯(CH3 COOC2 H5 ,CAS号 :141__78__6) ,色谱纯。

　　4 .1 .3 丙酮 (C3 H6 O,CAS号 :67__64__1) ,色谱纯。

　　4 .1 .4 正己烷 (C6 H14 ,CAS号 :110__54__3) ,色谱纯。

　　4 .1 .5 氯化钠(NaCl,CAS号 :7647__14__5) 。

　　4 .1 .6 无水硫酸镁(MgSO4 ,CAS号 :7487__88__9) 。

　　4 .1 .7 柠檬酸钠二水合物(C6 H5 Na3 O7 . 2H2 O,CAS号 :6132__04__3) 。

　　4 .1 .8 柠檬酸二钠盐倍半水合物(C6 H6 Na2 O7 . 1 .5H2 O,CAS号 :6132__05__4) 。

　　4 .2 标准品

　　环氧七氯 B 内标和 93 种农药及其代谢物标准品 ,见附录 A,纯度 ≥95% 。

　　4 .3 标准溶液配制

　　4 .3 .1 标准储备溶液(1 000 mg/L) :准确称取约 10 mg(精确至 0 .1 mg)农药及其代谢物标准品 ,根据标

　　准品的溶解性和测定的需求用丙酮 、正己烷或乙酸乙酯等溶剂溶解并分别定容至 10 mL,避光- 20 ℃及

　　4 .3 .2 混合标准储备溶液(50 mg/L) : 吸取一定量的农药标准储备溶液于容量瓶中 ,用乙酸乙酯定容至刻度 ,避光- 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 6 个月。

　　4 .3 .3 混合标准溶液(5 mg/L) : 吸取一定量的混合标准储备溶液于容量瓶中 ,用乙酸乙酯定容至刻度 ,避光- 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 1 个月。

　　4 .3 .4 内标溶液 :准确称取约 10 mg环氧七氯 B(精确至 0 .1 mg)用乙酸乙酯溶解后转移至 10 mL容量瓶中 ,定容混匀为内标储备液 . 内标储备溶液用乙酸乙酯稀释至 1 mg/L为内标溶液 .

　　4 .4 材料

　　4 .4 .1 陶瓷均质子 :2 cm(长) × 1 cm(外径) ,或相当者 .

　　4 .4 .2 乙二胺G NG丙基硅烷化硅胶(PSA) :粒径 40 μm~ 60 μm.

　　4 .4 .3 十八烷基硅烷键合硅胶(C18) :粒径 40 μm~ 60 μm.

　　4 .4 .4 微孔滤膜(有机相) :13 mm×0 .22 μm ,或相当者 .

　　5 仪器设备

　　5 .1 气相色谱 三重四极杆质谱联用仪 :配有电子轰击源(EI) .

　　5 .2 分析天平 :感量 0 .1 mg和 0 .01 g.

　　5 .3 离心机 :转速不低于 4 000 r/min.

　　5 .4 涡旋混合器 .

　　5 .5 氮吹仪 :可控温 .

　　6 分析步骤

　　6 .1 试样制备与储存

　　按照 NY/T 395 的要求采集新鲜土壤样品 ,去除石子 、植物根茎等杂质后混合均匀 ,不风干 ,放入聚乙

　　烯瓶或袋中 . 将样品按照测试和备用分别存放 ,于 - 20 ℃及以下条件保存 . 按照 NY/T 52 测定样品含

　　6 .2 提取和净化

　　称取 5 g试样(精确至 0 .01 g)于 50 mL塑料离心管中 ,加入 10 mL水涡旋混合均匀 ,静置 30 min.

　　加入 10 mL乙腈及 1 颗陶瓷均质子(4 .4 .1) ,涡旋振荡 3 min后 ,加入提取盐包(4 g无水硫酸镁 、1 g氯化钠 、1 g柠檬酸钠二水合物 、0 .5 g柠檬酸二钠盐倍半水合物) ,涡旋振荡 1 min后 ,4 000 r/min离心 5 min.准确吸取 6 mL上清液加到内含 900 mg硫酸镁 、150 mg C18 和 150 mg PSA 的 15 mL塑料离心管中 , 涡旋混匀 1 min. 4 000 r/min离心 5 min,准确吸取 2 mL上清液于 10 mL试管中 ,40 ℃水浴中氮气吹至近干 . 加入 50 μL的内标溶液 ,加入 1 mL乙酸乙酯复溶 ,过微孔滤膜(4 .4 .4) ,用于测定 .

　　6 .3 测定

　　6 .3 .1 仪器参考条件

　　a) 色谱柱 :5%苯基G 95%二甲基聚硅氧烷石英毛细管柱 ,30 m(柱长) × 0 .25 mm(内径) × 0 .25 μm

　　b) 色谱柱温度 :60 ℃保持 1 min,然后以 40 ℃/min程序升温至 120 ℃ ,再以 5 ℃/min升温至 310 ℃ ;

　　c) 载气 :氦气 ,纯度 ≥99 .999% ,流速 1 .0 mL/min;

　　d) 进样口温度 :280 ℃ ;

　　e) 进样量 :1 μL;

　　f) 进样方式 :不分流进样 ;

　　g) 吹扫时间 :0 .75 min;

　　h) 电子轰击源 :70 eV;

　　i) 离子源温度 :280 ℃ ;

　　j) 传输线温度 :280 ℃ ;

　　k) 溶剂延迟 :3 min;

　　l) 多反应监测 :每种农药分别选择 1 对定量离子、1 对定性离子 . 每组所有需要检测离子对按照出峰顺序 ,分时段分别检测 . 每种农药的保留时间、定量离子对、定性离子对和碰撞电压 ,见附录 B.

　　6 .3 .2 基质匹配标准工作曲线

　　空白土壤样品按照 6 .2 进行前处理 ,得到空白基质溶液。 准确吸取一定量的混合标准溶液 ,逐级用乙

　　酸乙酯释成质量浓度为 0 .002 mg/L、0 .01 mg/L、0 .05 mg/L、0 .1 mg/L和 0 .5 mg/L的系列标准工作溶

　　液 。取 2 mL空白基质溶液氮气吹干 ,加入 50 μL内标溶液 ,分别加入 1 mL上述标准工作溶液复溶 ,过微

　　孔滤膜配制成系列基质混合标准工作溶液 ,供气相色谱 质谱联用仪测定。

　　内标法以农药定量离子峰面积和内标物定量离子峰面积的比值为纵坐标 、农药标准溶液质量浓度和内标物质量浓度的比值为横坐标 ,绘制基质匹配标准工作曲线。

　　外标法以农药定量离子峰面积为纵坐标 、农药标准溶液质量浓度为横坐标 ,绘制基质匹配标准工作曲线。

　　6 .3 .3 定性及定量

　　6 .3 .3 .1 定性测定

　　试样中 目标农药色谱 峰 的 保 留 时 间 与 相 应 标 准 色 谱 峰 的 保 留 时 间 相 比 较 , 相 对 误 差 应 在 ± 2 .5%之内。

　　在相同实验条件下进行样品测定时 ,如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致 ,并且目标化合物选择的子离子均出现 ,而且同一检测批次 ,对同一化合物 ,样品中 目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比 ,其允许偏差不超过表 1 规定的范围 ,则可判断样品中存在目标农药。

　　表 1 定性时离子丰度比的最大允许偏差

　　本方法的标准物质 GC_MS/MS多反应监测质量色谱图参见附录 C。

　　6 .3 .3 .2 定量测定

　　内标法或外标法定量。

　　6 .3 .4 试样溶液的测定

　　将基质匹配标准工作溶液和试样溶液依次注入气相色谱 质谱联用仪中 ,保留时间和离子丰度比定性 ,测得定量子离子的质量色谱峰面积 ,待测试样溶液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内 ,超过线性范围时应稀释到线性范围内后再进行分析。

　　6 .4 平行测定

　　按以上步骤对同一试样进行 2 次平行试验测定。

　　6 .5 空白试验

　　除不加试料外 ,按照 6 .2 ~ 6 .4 的规定进行平行操作。

　　7 结果计算

　　试样中被测农药残留量以质量分数 ω 计 ,单位以毫克每千克(mg/kg)表示 ,外标法按公式(1)或公式(2)计算 , 内标法按公式(3)或公式(4)计算。

　　ω = × … … … … … … … … … … … … … (2)

　　(3)

　　式中 :

　　ρ1 — 基质匹配标准工作溶液中农药质量浓度的数值 ,单位为毫克每升(mg/L) ;

　　ρ2 — 从基质匹配标准工作曲线中得到的试样溶液中农药质量浓度的数值 ,单位为毫克每升(mg/L) ; A — 样品溶液中被测农药的峰面积 ;

　　AS — 基质匹配标准工作溶液中被测农药的峰面积 ;

　　ASi — 基质匹配标准工作溶液中内标物的峰面积 ;

　　Ai — 试样溶液中内标物的峰面积 ;

　　V1 — 提取溶剂总体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　V2 — 分取的提取溶液体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　V3 — 样品溶液定容体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　m — 新鲜土壤试样质量的数值 ,单位为克(g) ;

　　θm — 新鲜土壤试样的质量含水量 .

　　计算结果保留 2 位有效数字 . 当含量超 1 mg/kg时 ,保留 3 位有效数字 .

　　8 精密度

　　在重复性条件下 ,获得的 2 次独立测试结果的绝对差值不得超过重复性限(r) ,见附录 D.

　　在再现性条件下 ,获得的 2 次独立测试结果的绝对差值不得超过再现性限(R) ,见附录 D.

　　9 其他

　　本文件方法定量限为 0 .002 mg/kg(见附录 A) .

　　附 录 A

　　(规范性)

　　93 种农药及其代谢物中英文名称、分子式、CAS号和方法定量限

　　93 种农药及其代谢物中英文名称 、分子式 、CAS号和方法定量限 ,见表 A.1 。

　　表 A.1 93 种农药及其代谢物中英文名称、分子式、CAS号和方法定量限

　　表 A.1 (续)

　　表 A.1 (续)

　　附 录 B

　　(资料性)

　　93 种农药及其代谢物和内标化合物的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数

　　93 种农药及其代谢物和内标化合物的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数 ,见表 B.1。

　　表 B.1 93 种农药及其代谢物和内标化合物的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数

　　表 A.1 (续)

　　表 A.1 (续)

　　附 录 C

　　(资料性)

　　93 种农药及其代谢物和内标化合物的多反应监测(MRM)质量色谱图

　　93 种农药及其代谢物和内标化合物的多反应监测(MRM)质量色谱图见图 C.1 .

　　图 C.1 93 种农药及其代谢物和内标化合物的多反应监测(MRM)质量色谱图

　　32

　　图 C.1 (续)

　　图 C.1 (续)

　　34

　　图 C.1 (续)

　　35

　　图 C.1 (续)

　　36

　　图 C.1 (续)

　　附 录 D

　　(资料性)

　　93 种农药及其代谢物精密度数据

　　重复性限(r)要求见表 D.1 ,再现性限(R)要求见表 D.2 .

　　表 D.1 93 种农药及其代谢物的重复性限(r)

　　表 D.1 (续)

　　表 D.1 (续)

　　表 D.2 93 种农药及其代谢物的再现性限(R)

　　表 D.2 (续)

　　表 D.2 (续)

　　土壤中 200 种农药及其代谢物残留量的测定

　　第 5 部分 :土壤中 147 种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱 质谱联用法

　　1 范围

　　本部分规定了土壤中 147 种农药及其代谢物(见附录 A)的液相色谱 质谱联用检测方法。

　　本部分适用于土壤中上述 147 种农药残留量的测定。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中 ,注日期的引用文件 ,仅该日期对应的版 本 适 用 于 本 文 件 ; 不 注 日 期 的 引 用 文 件 , 其 最 新 版 本(包 括 所 有 的 修 改 单)适 用 于 本文件。

　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

　　NY/T52 土壤水分测定法

　　NY/T 395 农田土壤环境质量监测技术规范

　　3 原理

　　试样中农药用乙腈提取 ,提取液经分散固相萃取净化 ,液相色谱 质谱联用仪检测 ,外标法定量。

　　4 试剂与材料

　　除另有说明外 ,均使用分析纯试剂 ,水为 GB/T 6682 规定的一级水。

　　4 .1 试剂

　　4 .1 .1 乙腈(CH3 CN ,CAS号 :75__05__8) 。

　　4 .1 .2 甲醇(CH3 OH ,CAS号 :67__56__1) :色谱纯。

　　4 .1 .3 氯化钠(NaCl,CAS号 :7647__14__5) 。

　　4 .1 .4 无水硫酸镁(MgSO4 ,CAS号 :7487__88__9) 。

　　4 .1 .5 柠檬酸钠二水合物(C6 H5 Na3 O7 . 2H2 O,CAS号 :6132__04__3) 。

　　4 .1 .6 柠檬酸二钠盐倍半水合物(C6 H6 Na2 O7 . 1 .5H2 O,CAS号 :6132__05__4) 。

　　4 .1 .7 甲酸(HCOOH ,CAS号 :64__18__6) :色谱纯。

　　4 .1 .8 甲酸铵(HCOONH4 ,CAS号 :540__69__2) 。

　　4 .2 溶液配制

　　4 .2 .1 甲酸铵 甲 酸 水 溶 液 (2 mmol/L) : 称 取 0 .126 1 g 甲 酸 铵 , 用 0 .01% 甲 酸 水 溶 液 溶 解 并 稀 释 至1 000 mL,摇匀。

　　4 .2 .2 甲酸铵 甲酸甲醇溶液(2 mmol/L) :称取 0 .126 1 g 甲酸铵 ,用 0 .01%甲酸甲醇溶液溶解并稀释至 1 000 mL,摇匀。

　　4 .3 标准品

　　147 种农药及其代谢物标准品 ,见附录 A,纯度 ≥95% 。

　　4 .4 标准溶液配制

　　4 .4 .1 标准储备溶液(1 000 mg/L) :准确称取约 10 mg(精确至 0 .1 mg)农药及其代谢物标准品 ,根据标

　　准品的溶解性和测定的需要 ,选甲醇或乙腈等溶剂溶解并分别定容至 10 mL,避光- 20 ℃及以下条件保

　　4 .4 .2 混合标准储备溶液(50 mg/L) : 吸取一定量的农药标准储备溶液于容量瓶中 ,用乙腈定容至刻度 ,避光- 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 6 个月 .

　　4 .4 .3 混合标准溶液(5 mg/L) : 吸取一定量的混合标准储备溶液于容量瓶中 ,用乙腈定容至刻度 ,避光- 20 ℃及以下条件保存 ,有效期 1 个月 .

　　4 .5 材料

　　4 .5 .1 陶瓷均质子 :2 cm(长) × 1 cm(外径) ,或相当者 .

　　4 .5 .2 乙二胺G NG丙基硅烷化硅胶(PSA) :粒径 40 μm~ 60 μm.

　　4 .5 .3 十八烷基硅烷键合硅胶(C18) :粒径 40 μm~ 60 μm.

　　4 .5 .4 微孔滤膜(有机相) :13 mm×0 .22 μm ,或相当者 .

　　5 仪器设备

　　5 .1 液相色谱 三重四极杆质谱联用仪 :配有电喷雾离子源(ESI) .

　　5 .2 分析天平 :感量 0 .1 mg和 0 .01 g.

　　5 .3 离心机 :转速不低于 4 000 r/min.

　　5 .4 涡旋混合器 .

　　6 分析步骤

　　6 .1 试样制备与贮存

　　按照 NY/T 395 的要求采集新鲜土壤样品 ,去除石子 、植物根茎等杂质后混合均匀 ,不风干 ,放入聚乙

　　烯瓶或袋中 . 将样品按照测试和备用分别存放 ,于 - 20 ℃及以下条件保存 . 按照 NY/T 52 测定样品含

　　6 .2 提取和净化

　　称取 5 g试样(精确至 0 .01 g)于 50 mL塑料离心管中 ,加入 10 mL水涡旋混合均匀 ,静置 30 min.

　　加入 10 mL乙腈及 1 颗陶瓷均质子(4 .5 .1) ,涡旋振荡 3 min后 ,加入提取盐包(4 g无水硫酸镁 、1 g氯化钠 、1 g柠檬酸钠二水合物 、0 .5 g柠檬酸二钠盐倍半水合物) ,涡旋振荡 1 min后 ,4 000 r/min离心 5 min.准确吸取 6 mL上清液加到内含 900 mg硫酸镁 、150 mg C18 和 150 mg PSA 的 15 mL塑料离心管中 , 涡旋混匀 1 min. 4 000 r/min离心 5 min, 吸取上清液过微孔滤膜(4 .5 .4) ,待测定 .

　　注 :测定磺酰脲类除草剂(酰嘧磺隆 、苄 嘧 磺 隆 、氯 嘧 磺 隆 、氯 磺 隆 、醚 磺 隆 、环 丙 嘧 磺 隆 、乙 氧 磺 隆 、氟 唑 磺 隆 、氟 吡 磺隆 、氯吡嘧磺隆 、甲基碘磺隆钠盐 、甲 基 二 磺 隆 、嗪 吡 嘧 磺 隆 、甲 磺 隆 、单 嘧 磺 隆 、烟 嘧 磺 隆 、嘧 苯 胺 磺 隆 、丙 嗪 嘧 磺隆 、吡嘧磺隆 、砜嘧磺隆 、噻酮磺隆 、噻吩磺隆 、醚苯 磺 隆 、苯 磺 隆 、氟 胺 磺 隆 、三 氟 甲 磺 隆) 、三 唑 并 嘧 啶 磺 酰 胺 类 除草剂(唑嘧磺草胺 、五氟磺草胺)和苯嘧磺草胺时 ,净化材料中不使用 PSA.

　　6 .3 测定

　　6 .3 .1 仪器参考条件

　　a) 色谱柱 :C18 柱 ,100 mm(柱长) × 4 .6 mm(内径) × 1 .8 μm(粒径) ,或相当者 ;

　　b) 流动相 :A相为甲酸铵 甲酸水溶液(4 .2 .1) ,B 相为甲酸铵 甲酸甲醇溶液(4 .2 .2) , 流动相梯度条件见表 1 ;

　　c) 流速 :0 .3 mL/min;

　　d) 柱温 :40 ℃ ;

　　e) 进样量 :2 μL.

　　表 1 流动相及其梯度条件(VA+VB)

　　表 1 (续)

　　6 .3 .2 质谱参考条件

　　a) 离子源类型 : 电喷雾离子源(ESI) ;

　　b) 扫描方式 :正离子和负离子同时扫描 ;

　　c) 雾化气流速 :3 .0 L/min;

　　d) 加热气流速 :10 L/min;

　　e) 干燥气流速 :10 L/min;

　　f) DL温度 :150 ℃ ;

　　g) 加热模块温度 :400 ℃ ;

　　h) 接口温度 :300 ℃ ;

　　i) 多反应监测 :每种农药分别选择至少 2 个子离子。 所有需要检测的子离子按照出峰顺序 ,分时段

　　6 .3 .3 基质匹配标准工作曲线

　　空白土壤样品按照 6 .2 进行前处理 ,得到空白基质溶液。 准确吸取一定量的混合标准溶液 ,逐级用空

　　白基质溶液稀释成质量浓度为 0 .001 mg/L、0.005 mg/L、0.01 mg/L、0.02 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、

　　0 .2 mg/L 和 0 .5 mg/L的系列基质匹配标准工作溶液 ,根据仪器性能和检测需要选择不少于 5 个质量浓

　　度点 ,供液相色谱 质谱联用仪测定。 以农药定量子离子的质量色谱峰面积为纵坐标 ,相对应的基质匹配

　　标准工作溶液质量浓度为横坐标 、绘制基质匹配标准工作曲线。

　　6 .3 .4 定性及定量

　　6 .3 .4 .1 定性测定

　　试样中 目标农药色谱 峰 的 保 留 时 间 与 相 应 标 准 色 谱 峰 的 保 留 时 间 相 比 较 , 相 对 误 差 应 在 ± 2 .5%之内。

　　在相同实验条件下进行样品测定时 ,如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致 ,并且目标化合

　　物选择的子离子均出现 ,而且同一检测批次 ,对同一化合物 ,样品中 目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比 ,其允许偏差不超过表 2 规定的范围 ,则可判断样品中存在目标农药。

　　表 2 定性时离子丰度比的最大允许偏差

　　本方法的标准物质 LC_MS/MS多反应监测质量色谱图见附录 C。

　　6 .3 .4 .2 定量测定

　　外标法定量。

　　6 .3 .5 试样溶液的测定

　　将基质匹配标准工作溶液和试样溶液依次注入液相色谱 质谱联用仪中 ,保留时间和离子丰度比定

　　性 ,测得定量子离子的质量色谱峰面积 ,待测试样溶液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内 ,超过线性范围时应稀释到线性范围内后再进行分析。

　　6 .4 平行试验

　　按以上步骤对同一试样进行 2 次平行试验测定。

　　6 .5 空白试验

　　除不加试料外 ,按照 6 .2 ~ 6 .4 的规定进行平行操作。

　　7 结果计算

　　试样中被测农药残 留 量 以 质 量 分 数 ω 计 , 单 位 以 毫 克 每 千 克(mg/kg)表 示 , 按 公 式 (1)或 公 式 (2)计算。

　　式中 :

　　ρ1 — 基质匹配标准工作溶液中农药质量浓度的数值 ,单位为毫克每升(mg/L) ;

　　ρ2 — 从基质匹配标准工作曲线中得到的试样溶液中农药质量浓度的数值 ,单位为毫克每升(mg/L) ; A — 样品溶液中被测农药的峰面积 ;

　　AS — 基质匹配标准工作溶液中被测农药的峰面积 ;

　　V1 — 提取溶剂总体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　V2 — 分取的提取溶液体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　V3 — 样品溶液定容体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

　　m — 新鲜土壤试样质量的数值 ,单位为克(g) ;

　　θm — 新鲜土壤试样的质量含水量。

　　计算结果保留 2 位有效数字。 当含量超 1 mg/kg时 ,保留 3 位有效数字。

　　8 精密度

　　在重复性条件下 ,获得的 2 次独立测试结果的绝对差值不得超过重复性限(r) ,见附录 D。

　　在再现性条件下 ,获得的 2 次独立测试结果的绝对差值不得超过再现性限(R) ,见附录 D。

　　9 其他

　　本文件方法定量限为 0 .002 mg/kg(见附录 A) 。

　　附 录 A

　　(规范性)

　　17 种有机磷类农药及其代谢物中英文名称、分子式、CAS号和方法定量限

　　147 种农药及其代谢物中英文名称 、分子式 、CAS号和方法定量限 ,见表 A.1 .

　　表 A.1 147 种农药及其代谢物中英文名称、分子式、CAS号和方法定量限

　　表 A.1 (续)

　　表 A.1 (续)

　　表 A.1 (续)