基于UPLC-Q-TOF-MS技术和网络药理学探讨杜仲提取物防治肾间质纤维化的作用机制

目的:应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术、网络药理学及分子对接技术系统探究杜仲提取物在防治肾间质纤维化(Renal Interstitial Fibrosis,RIF)中的作用机制。方法:第一步,采用UPLC-Q-TOF-MS技术对杜仲提取物的化学成分进行鉴别,借助PubChem数据库及Siwissprediction数据库预测其潜在靶点。第二步,检索、获取并整合来自多个权威数据库(GeneCards、OMIM、DisGeNET、TTD)的RIF潜在靶点,并联用韦恩图来确定杜仲防治RIF的潜在靶点,以进一步构建蛋白互作(PPI)网络图。第三步,在DAVID数据库里,对GO功能和KEGG通路进行富集分析,并将分析数据通过微生信平台进行可视化展示。第四步,利用Auto Dock Tools对杜仲关键成分和RIF核心靶点进行分子对接。结果:杜仲提取物中的29种有效活性成分被成功筛选出,确定了96个与RIF相关的交集靶点。并通过PPI网络筛选出的有丝氨酸和苏氨酸激酶AKT(AKT1)、表皮生长因子受体(EGFR)、尿微量白蛋白(ALB)等15个核心靶点为杜仲防治RIF的关键靶点。通过富集分析发现,脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、Rap1信号通路等都是防治RIF的潜在关键通路。这些通路与炎症、免疫调节、代谢异常等RIF的发病机制密切相关。分子对接结果表明,杜仲提取物主要活性成分如京尼平苷、异绿原酸A、异绿原酸B与GAPDH、ALB、AKT、EGFR等靶点蛋白之间可以结合形成稳定且有效的复合物,进一步证实了杜仲提取物在防治RIF中的潜在疗效。结论:杜仲提取物防治RIF具有多有效成分、多药效靶点、多作用通路的复杂机制,存在潜在的疗效。本研究为杜仲抗RIF的作用机制提供了有价值的认识,为进一步的实验验证和临床应用奠定了基础。