禾谷炭疽菌CgRab5A的亚细胞定位研究
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为明确禾谷炭疽菌(Colletotrichum graminicola)中CgRab5A(GLRG00019)蛋白在细胞内的定位特点,利用多片段一步克隆法将CgRab5A自身启动子、GFP片段和CgRab5A开放阅读框(ORF)片段克隆到pKNT载体上,转化野生型禾谷炭疽菌的原生质体后,通过新霉素抗性筛选获得阳性候选转化子,利用共聚焦显微镜观察GFP-CgRab5A在菌丝和孢子内的定位情况。结果表明,一步克隆法获得的pKNT-GFP-CgRab5A重组载体经测序后序列完全正确,亚细胞定位观察发现GFP-CgRab5A在菌丝和孢子细胞内均呈点状分布,定位于早期内涵体上,暗示其可能参与早期内涵体的相关调控过程。
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本文档关键词:禾谷,炭疽,定位,细胞,研究