非小细胞肺癌HCC827奥希替尼耐药细胞株的建立及耐药机制探讨

目的体外构建人非小细胞肺癌(NSCLC)奥希替尼耐药细胞株HCC827OR,并探讨耐药机制。方法使用NSCLC细胞株HCC827,通过浓度递增法构建奥希替尼耐药细胞株HCC827OR,并比较两种细胞株形态学、增殖能力、细胞凋亡以及细胞蛋白质表达的差异。结果半抑制浓度(IC50)及耐药指数(RI)结果显示,HCC827OR对奥希替尼高度耐受,且HCC827OR与HCC827细胞形态差异明显。CCK8增殖实验第1天,HCC827OR的细胞活性高于HCC827(P<0.05),第2、3、4天,HCC827OR的细胞活性显著高于HCC827(P<0.01)。克隆形成实验结果显示,HCC827OR集落形成数高于HCC827(P<0.01)。EdU染色后,HCC827OR的EdU阳性细胞数高于HCC827(P<0.01)。凋亡实验结果显示,与HCC827比较,HCC827OR细胞凋亡减少(P<0.01)。Western blot实验结果显示,相较于HCC827,HCC827OR细胞的EGFR和p-EGFR的表达下降,p-AKT、p-ERK和Vimentin的表达上升。结论成功构建NSCLC奥希替尼耐药细胞株HCC827OR,推测耐药机制与EGFR、p-EGFR表达减少,p-AKT、p-ERK和Vimentin表达增加有关。

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本文档关键词:细胞,探讨,机制,细胞株,耐药