异丙酚对缺氧_复氧诱导PC12细胞损伤的影响及其分子机制

目的探讨异丙酚对缺氧/复氧(H/R)诱导PC12细胞损伤的影响及其分子机制。方法体外培养PC12细胞,将其分为control组(正常条件21%O2/5%CO2/74%N2培养)、H/R组(缺氧条件3%O2/5%CO2/92%N2培养2 h,正常条件下培养12 h)、H/R+异丙酚组(50μmol/L异丙酚预处理1 h后用H/R处理)、H/R+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC后用H/R处理)、H/R+anti-miR-1246组(转染anti-miR-1246后用H/R处理)、H/R+异丙酚+miR-NC组(转染miR-NC,再经50μmol/L异丙酚和H/R处理)、H/R+异丙酚+miR-1246(转染miR-1246,再经50μmol/L异丙酚和H/R处理);MTT和流式细胞术分别用于检测细胞活力和凋亡;Western blot分析凋亡相关蛋白表达[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2关联x蛋白(Bax)];酶联免疫吸附试验检测促炎性细胞因子和抗炎细胞因子表达水平;定量逆转录聚合酶链反应检测miR-1246的表达水平。结果采用50μmol/L异丙酚处理时细胞存活率最高,故后续实验,异丙酚浓度选择50μmol/L。与control组比较,H/R组细胞凋亡率、Bax蛋白、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平升高,Bcl-2蛋白和IL-10水平降低(P<0.05)。与H/R组比较,H/R+异丙酚组细胞凋亡率、Bax蛋白、TNF-α、IL-1β和IL-18水平降低,Bcl-2蛋白和IL-10水平升高(P<0.05)。与control组比较,H/R组中miR-1246表达升高(P<0.05)。与H/R组比较,H/R+异丙酚组中miR-1246表达降低(P<0.05)。H/R组与H/R+anti-miR-NC组miR-1246水平、细胞凋亡率、Bcl-2蛋白、Bax蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-18、IL-10水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与H/R+anti-miR-NC组比较,H/R+anti-miR-1246组miR-1246水平、细胞凋亡率、Bax蛋白、TNF-α、IL-1β和IL-18水平降低,Bcl-2蛋白和IL-10水平升高(P<0.05)。与H/R+异丙酚+miR-NC组比较,H/R+异丙酚+miR-1246组miR-1246表达水平、细胞凋亡率、Bax蛋白及TNF-α、IL-1β、IL-18水平升高,Bcl-2蛋白和IL-10水平降低(P<0.05)。结论异丙酚通过下调miR-1246缓解H/R诱导的PC12细胞损伤。

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本文档关键词:分子,损伤,及其,细胞,机制