以下是T/NAIA 0374-2025团体标准的详细内容总结：
一、标准基本信息
- 标准编号：T/NAIA 0374-2025
- 名称：牛奶和奶粉中7种喹诺酮类残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
- 归口单位：宁夏化学分析测试协会
- 起草单位：
- 宁夏回族自治区食品检测研究院
- 宁夏计量质量检验检测研究院
- 北方民族大学
- 宁夏化学分析测试协会
- 主要起草人：朱燕燕、马桂娟等10人。
二、适用范围
- 检测对象：牛奶及奶粉中的7种喹诺酮类药物：
恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、达氟沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、洛美沙星。
- 定量限：均为 2.0 μg/kg。
三、方法原理
- 提取：用 2%甲酸乙腈溶液 超声提取样品。
- 净化：通过 分散固相萃取（d-SPE） 净化（吸附剂为 C18粉末 和 无水硫酸镁）。
- 分析：经 C18反相色谱柱 分离，液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS） 检测。
- 定量：采用 外标法。
四、关键试剂与材料
- 提取溶剂：2%甲酸乙腈溶液（20 mL甲酸 + 乙腈定容至1 L）。
- 净化吸附剂：
- 流动相：
- A相：0.2%甲酸水溶液
- B相：0.2%甲酸乙腈溶液
- 标准品：纯度 ≥98.8%（详见附录A）。
五、仪器设备
- 核心设备：液相色谱-串联质谱仪（带 电喷雾离子源ESI）。
- 辅助设备：
- 高速离心机（≥9000 r/min）
- 涡旋混合器、超声波清洗器、氮吹仪
- 有机微孔滤膜（0.22 μm）
六、分析步骤
1. 样品制备
- 牛奶：混合均匀后 -18℃避光保存。
- 奶粉：混合均匀后 常温避光保存。
2. 提取
- 称取 5 g牛奶 或 1 g奶粉，加入 10 mL 2%甲酸乙腈溶液 和 10 g无水硫酸镁，涡旋后超声20 min，离心取上清液，重复提取一次。
3. 净化
- 取5 mL上清液，加入 100 mg C18粉末 和 500 mg无水硫酸镁，涡旋离心后取4 mL上清液，40℃氮吹至近干，用初始流动相定容至1 mL，过滤后上机。
4. 色谱条件
- 色谱柱：C18柱（2.1 mm × 150 mm，3.5 μm）。
- 流速：0.3 mL/min，进样量5 μL。
- 梯度洗脱程序（见表1）：
| 时间（min） |
流动相A（%） |
流动相B（%） |
| 0.00–2.00 |
95 |
5 |
| 2.01–9.00 |
40 → 20 |
60 → 80 |
| 9.01–11.00 |
95 |
5 |
5. 质谱条件
- 离子源：ESI（正离子模式）。
- 监测模式：多反应监测（MRM）。
- 关键参数：
- 毛细管电压：3500 V
- 雾化气压力：310 kPa
- 碰撞能量：14–46 eV（详见附录B）。
七、定性定量要求
1. 定性确证
- 保留时间偏差：≤ ±2.5%。
- 离子丰度比偏差：根据丰度范围允许±20%–±50%（见表2）。
2. 定量方法
- 使用 基质标准曲线（浓度范围：0.2–100 ng/mL）。
- 计算公式：
X = \frac{C \times V \times 1000}{m \times 1000} \times f
X：残留量（μg/kg）C：试样浓度（ng/mL）V：定容体积（mL）m：试样质量（g）f：稀释倍数
八、方法验证指标
- 精密度：平行测定结果绝对差值 ≤ 算术平均值的 10%。
- 定量限：所有目标物均为 2.0 μg/kg。
九、附录内容
- 附录A：7种喹诺酮的分子式、CAS号及纯度（如恩诺沙星：C₁₉H₂₂FN₃O₃，93106-60-6，98.2%）。
- 附录B：质谱参数表（如恩诺沙星定量离子对：m/z 360.0 → 342.1）。
- 附录C：7种喹诺酮的定量离子对典型色谱图（展示分离效果）。
总结
该标准建立了牛奶和奶粉中 7种喹诺酮类药物残留 的 HPLC-MS/MS检测方法，涵盖样品处理、仪器分析、定性定量规则及方法验证要求，适用于食品安全监管中对喹诺酮残留的高灵敏度检测（定量限2.0 μg/kg）。
