DB54/T 0592-2026 藏猪大肠杆菌病防治技术规范

　　ICS 65.020.30 CCS B 41

　　54

　　西 藏 自 治 区 地 方 标 准

　　DB 54/T 0592—2026

　　藏猪大肠杆菌病防治技术规范

　　2026 - 03 - 09 发布 2026 - 04 - 09 实施

　　西藏自治区市场监督管理局 发 布

　　DB 54/T 0592—2026

　　前 言

　　本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

　　起草。

　　本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

　　本文件由西藏自治区农业农村标准化技术委员会提出并归口。

　　本文件起草单位：西藏农牧大学、江苏农牧科技职业学院、南京农业大学。

　　本文件主要起草人：罗润波、封琦、吴双、秦枫、朱善元、曹瑞兵、林焱、商鹏、谭占坤、张红亮、李可欣、钟亚男。

　　藏猪大肠杆菌病防治技术规范

　　1 范围

　　本文件规定了藏猪大肠杆菌病的诊断、预防、治疗和疫情监测与处理等方面的技术要求。

　　本文件适用于藏猪大肠杆菌病的防治。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

　　GB 4789.6 食品安全国家标准 食品微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验

　　GB 5749 生活饮用水卫生标准

　　GB 13078 饲料卫生标准

　　GB/T 36195 畜禽粪便无害化处理技术规范

　　NY/T 388 畜禽场环境质量标准

　　NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

　　NY/T 682 畜禽场场区设计技术规范

　　NY/T 1167 畜禽场环境质量及卫生控制规范

　　NY/T 2839 致仔猪黄痢大肠杆菌分离鉴定技术

　　NY/T 3075 畜禽养殖场消毒技术

　　3 术语和定义

　　下列术语和定义适用于本文件。

　　3.1

　　致泻大肠埃希氏菌

　　引发畜禽肠道感染、导致腹泻症状的一群大肠杆菌。常见的致泻大肠埃希氏菌主要包括肠道致病性大肠埃希氏菌、肠道侵袭性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、产志贺毒素大肠埃希氏菌(包括肠道出血性大肠埃希氏菌)和肠道集聚性大肠埃希氏菌。

　　3.2

　　藏猪大肠杆菌病

　　由大肠埃希氏菌感染藏猪仔猪所引起的一类肠道传染性疾病的总称，常见的是仔猪黄痢、仔猪白痢和猪水肿病三种类型。

　　4 诊断

　　4.1 临床综合诊断

　　4.1.1 易感动物

　　7日龄内仔猪易感仔猪黄痢;10日龄～30日龄仔猪易感仔猪白痢;断奶仔猪易感猪水肿病。

　　4.1.2 传染源

　　主要是病猪和带菌猪。

　　4.1.3 传播途径

　　主要通过消化道传播，粪-口传播是主要途径。

　　4.1.4 流行特点

　　一年四季均可发生，春冬季气候剧变时多发。

　　4.2 临床症状

　　4.2.1 仔猪黄痢

　　以腹泻、粪便呈水样或黄色糨糊状为特征。

　　4.2.2 仔猪白痢

　　以腹泻、粪便呈白色糨糊状为特征。

　　4.2.3 猪水肿病

　　以颜面部和颈部水肿、神经系统症状为特征。

　　4.3 病理变化

　　4.3.1 仔猪黄痢

　　呈急性卡他性胃肠炎，少数为出血性胃肠炎。胃膨胀，充满酸臭的白色、黄白色或混有血液的凝乳块。胃壁水肿，胃底和幽门部黏膜潮红并有出血点或出血斑，黏膜上覆盖大量黏液。十二指肠病变最严重，空肠、回肠次之，而结肠较轻。

　　4.3.2 仔猪白痢

　　病程短的几乎不见胃肠炎的病变，病程稍长的病例呈现轻度卡他性胃肠炎的变化， 胃内有凝乳块。胃黏膜尤其是幽门部黏膜充血水肿，有的可见出血点。小肠黏膜充血，肠腔扩张，其内有灰白色糨糊状的内容物并混有气体，气味腥臭。

　　4.3.3 猪水肿病

　　特征病变是水肿，常见于耳、鼻、唇、眼眶等部位，有时波及颈部、前肢和腹部皮下。病变皮肤和黏膜肿胀、苍白。

　　4.4 实验室诊断

　　4.4.1 样品采集及运送

　　采集肠内容物或粪便，置于无菌采样袋中。样品采集和运送符合NY/T 541的规定。

　　4.4.2 分离鉴定

　　具体操作步骤见附录A。

　　4.4.3 大肠埃希氏菌分型毒力基因鉴定

　　分离菌株符合4.4.2中大肠杆菌特性的进行PCR鉴定。参照GB 4789.6进行，操作步骤见附录B。

　　4.4.4 大肠埃希氏菌黏附素基因鉴定

　　参照NY/T 2839进行，操作步骤见附录C。

　　4.5 综合判定

　　4.5.1 仔猪黄痢

　　临床症状符合4.2.1，病原鉴定主要为产肠毒素大肠埃希氏菌，以F4/F5/F6/F41菌毛为主。

　　4.5.2 仔猪白痢

　　临床症状符合4.2.2，病原鉴定主要为产肠毒素大肠埃希氏菌，以F5/F41菌毛为主。

　　4.5.3 猪水肿病

　　临床症状符合4.2.3，病原鉴定为产志贺毒素大肠埃希氏菌， 以F18菌毛为主。

　　5 预防

　　5.1 饲养管理

　　饲养管理遵循以下要求。

　　a) 场区设计符合 NY/T 682 的规定。

　　b) 饲料和饲料添加剂使用符合 GB 13078 的规定。

　　c) 饮水水质符合 GB 5749 的规定。

　　d) 环境质量及卫生控制符合 NY/T 388、NY/T 1167 的规定。

　　5.2 免疫接种

　　5.2.1 疫苗选择

　　符合《兽药管理条例》和《中华人民共和国动物防疫法》的规定。

　　5.2.2 疫苗接种

　　对疫区和受威胁区的猪群定期接种疫苗，按照疫苗使用说明书进行免疫。

　　5.2.3 注意事项

　　免疫接种遵循以下注意事项。

　　a) 选择针对本地区流行菌株疫苗进行免疫接种。

　　b) 疫苗保存、接种剂量严格按照使用说明书进行。

　　c) 接种前核查藏猪健康状况，接种时避免交叉感染。

　　d) 进行免疫抗体效价监测，开展补免工作。

　　e) 根据本地区流行病学监测结果，优化免疫程序。

　　5.3 消毒

　　5.3.1 消毒制度

　　日常消毒和紧急消毒相结合，制定并严格执行消毒制度。

　　5.3.2 消毒管理

　　消毒管理遵循以下要求。

　　a) 消毒剂选择符合《中华人民共和国药典》和《中华人民共和国兽药典》 的规定，严格按照说明书使用。

　　b) 定期对场区道路、猪场内部环境及工具进行消毒，在疫病多发季节增加消毒频次。

　　c) 场区入口设置可覆盖全车的消毒设施，严格执行消毒程序。生产区设置消毒通道，人员消毒后方可进出。

　　d) 消毒记录包括消毒日期，消毒场所，消毒剂名称、生产厂家、生产批号，消毒浓度，消毒方法，消毒人员签字。

　　e) 不同生产环节消毒符合 NY/T 3075 的规定。

　　6 治疗

　　6.1 治疗原则

　　按照早发现、早隔离、早治疗的原则，采用抗菌、补液等措施治疗。

　　6.2 抗菌疗法

　　兽药的使用符合《中华人民共和国兽药典》的规定。推荐使用喹诺酮类(环丙沙星)、头孢类(头孢噻呋)及磺胺类(磺胺甲噁唑)抗生素，具体使用方法参考药物使用说明书进行。有条件的可根据药敏试验选用敏感抗生素。

　　6.3 对症疗法

　　严重下痢的病猪， 口服痢菌净(5 mL/kg)，每日1次～2次，混料喂服硫酸钠或硫酸镁20 g、大黄末6 g，两天后，病猪口服土霉素盐酸盐40 mg/kg，每天1次，连续5天;肌肉注射硫酸链霉素(10 000 IU/kg)混合维生素B12(100 μg/头～200 μg/头)，每日2次，连用2天。水肿症状的病猪静脉注射25 %甘露醇250 mL、10 %葡萄糖250 mL、维生素C 1 g，每日1次;肌肉注射100万单位硫酸卡那霉素加地塞米松5 mg，每日2次。

　　6.4 中药疗法

　　选用白头翁散、四黄止痢颗粒等中药复方制剂灌服或拌料饲喂，使用方法参考药物使用说明进行。

　　7 疫情监测与处理

　　疫情监测与处理遵循以下要求。

　　a) 根据养殖场(户或村或牧场)及周边地区大肠杆菌病流行情况制定监测计划，按照计划开展病原学监测。

　　b) 周边地区大肠杆菌病流行时应进行紧急监测。

　　c) 受威胁藏猪群进行紧急免疫接种。

　　d) 病死藏猪、粪便等污染物按照《病死畜禽和病害畜禽产品无害化处理管理办法》和 GB/T 36195的规定进行处理。

　　e) 该病暴发流行时，按照农业农村部动物疫情报告的规定及时上报并处置。

　　附 录 A

　　(资料性)

　　大肠埃希氏菌的分离鉴定

　　A.1 培养基

　　营养肉汤培养基、伊红美蓝琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基等均选用商品化培养基，配制按说明书进行。

　　A.2 分离鉴定

　　大肠埃希氏菌的分离培养步骤如下。

　　a) 称取 1 g 样品接种于灭菌后的 5 mL 营养肉汤培养基中，置于 37 ℃的恒温摇床上培养 12 h~

　　18 h。

　　b) 将增菌液划线接种麦康凯琼脂培养基和伊红美蓝琼脂培养基平板，于 37 ℃培养 18 h～24 h，观察菌落特征。

　　c) 在麦康凯琼脂培养基平板上，典型菌落为砖红色。

　　d) 在伊红美蓝琼脂培养基平板上，典型菌落为中心紫黑色带或不带金属光泽。

　　A.3 形态学检查

　　取纯化单菌落，进行革兰氏染色镜检。大肠埃希氏菌在革兰氏染色后可明显观察到分离菌为无芽孢的革兰氏阴性短杆菌。

　　A.4 生化鉴定

　　菌落特征和形态学检查符合大肠埃希氏菌特性的菌株进行生化鉴定。具体操作步骤及结果判定参照商品化大肠埃希氏菌生化鉴定试剂盒说明书。

　　A

　　A

　　附 录 B

　　(资料性)

　　大肠埃希氏菌分型毒力基因鉴定

　　B.1 模板提取

　　取新鲜菌落，加灭菌水0.5 mL，煮沸10 min，冷却，1 2000 r/min离心2 min。取上清液即为DNA模板。也可选用商品化试剂盒参照说明书进行DNA提取。

　　B.2 引物信息

　　表 A.1 大肠埃希氏菌分型毒力基因鉴定引物信息表

　　B.3 PCR 反应体系及程序

　　以B.1中的上清液为模板，具体反应体系及程序参照商品化DNA聚合酶说明书进行，并设立阴阳性对照。

　　B.4 PCR 扩增产物电泳检测

　　PCR产物经1.2 %琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像分析。

　　B.5 结果判定

　　阴阳性对照成立，则试验成立。根据电泳图中目标条带大小，判断目标条带的种类，记录每个泳道中目标条带的种类，在下表中查找不同目标条带种类及组合所对应的致泻大肠埃希氏菌类别。

　　表 A.2 大肠埃希氏菌分型毒力基因鉴定结果对照表

　　B

　　附 录 C

　　(资料性)

　　大肠埃希氏菌黏附素基因鉴定

　　C.1 引物信息

　　表 B.1 大肠埃希氏菌黏附素基因鉴定引物信息表

　　C.2 PCR 反应体系及程序

　　以B.1中的上清液为模板，具体反应体系及程序参照商品化DNA聚合酶说明书进行，并设立阴阳性对照。

　　C.3 PCR 扩增产物电泳检测

　　PCR产物经1.2 %琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像分析。

　　C.4 结果判定

　　阴阳性对照成立，则试验成立。被检样品若出现相应的特异性条带，即判为阳性，否则判为阴性。