高产L-(+)-乳酸植物乳杆菌工程菌的构建与应用
作者:赵辉著
出版时间:2010年版
内容简介
从发酵酸菜中分离得到植物乳杆菌,通过基因敲除,使植物乳杆菌的D-乳酸脱氢酶基因失活,建立了工程菌。工程菌的L-乳酸脱氢酶活力占总乳酸脱氢酶活力的比例提高到92.5%,L-乳酸的比例提高到75.7%。对工程菌的培养条件进行优化,15 L发酵罐中试发酵,得72 h最高产酸量为31.1 g·L-1,产酸率比优化前提高了40.1%。应用于发酵黄瓜,使L-乳酸的比例提高了14.8%。
目录
1 绪论
1.1 乳酸的理化性质
1.2 L-(+)-乳酸及其应用
1.3 L-乳酸生产的研究
1.4 发酵法生产L-乳酸的研究
1.5 植物乳杆菌的作用与应用
2 乳酸菌的分离和初步鉴定
2.1 乳酸菌的分离纯化
2.2 形态学鉴定
2.3 乳酸菌的生化鉴定
2.4 LactobacillusplantarumHF1生长产酸特性的研究
3 产高比例L-(+)-乳酸植物乳杆菌工程菌的构建
3.1 乳酸脱氢酶的催化反应机理
3.2 乳酸脱氢酶分子生物学研究
3.3 基因敲除的原理和在微生物育种上的应用
3.4 L-(+)-乳酸高产植物乳杆菌工程菌的构建
3.5 工程菌表达特性的研究
4 工程菌产乳酸发酵条件的优化
.1 L.plantarumHF1.1培养基的优化
4.2 发酵条件的优化
4.3 分批中试发酵的研究
4.4 补料发酵的研究
5 工程菌用于发酵黄瓜的研究
5.1 HF3和HF5生长曲线的研究
5.2 HF3和HF5最适生长温度的研究
5.3 菌种耐盐试验
5.4 混合菌种发酵试验
5.5 工程菌与野生菌对比试验
5.6 黄瓜中试发酵试验
6 工程菌构建与应用的探讨
6.1 发酵蔬菜中乳酸菌的分离和鉴定
6.2 植物乳杆菌HF1和HF1.1乳酸脱氢酶的测定
6.3 植物乳杆菌HF1和HF1.1乳酸旋光性的测定方法
6.4 基因敲除法建立植物乳杆菌工程菌的可行性探讨
6.5 敲除载体的构建
6.6 转化子的筛选和鉴定
6.7 工程菌表达的特点
6.8 工程菌发酵条件的优化
6.9 多菌株联合发酵生产乳酸黄瓜
参考文献
附录
附录Ⅰ 培养基
附录Ⅱ 试验菌株
附录Ⅲ 仪器、设备和试剂
附录Ⅳ 试剂配制