医学分子生物学实验技术 第2版
作者:药立波主编;韩骅,常智杰,焦炳华副主编
出版时间: 2011年版
内容简介
分子生物学是生命科学发展中最重要的前沿领域,也是许多相关学科的理论和技术基础,其在医学研究中的重要性更是无论怎样强调也不过分。以重组DNA技术为中心内容的分子生物学方法学在20世纪80年代初结束了创始阶段,实现了在全世界的普及,并且在多方面不断有新的进展,手段日新月异。随着人类基因组计划的完成,分子生物学技术在医学领域中的应用越来越一泛。因此,分子生物学理论和分子生物学技术在医学院校的研究生教学中的重要性日益凸显。加强基础医学和临床医学专业研究生的分子生物学实验技术教学,将极大地促进在研究课题中充分利用先进的分子生物学技术手段以更好地解决医学问题。
目录
绪论第一章 聚合酶链反应 第一节 PCR技术概述 第二节 PCR的引物设计和条件优化 第三节 PCR产物的鉴定方法 第四节 PCR的基本类型及应用 第五节 实时定量PCR第二章 DNA体外重组 第一节 DNA体外重组的基本流程 第二节 载体的选择及准备 第三节 目的DNA片段的获取 第四节 DNA片段与载体的连接 第五节 重组DNA转化宿丰细胞 第六节 重组DNA的克隆筛选及鉴定第三章 DNA序列分析技术 第一节 常规DNA序列测定的原理 第二节 自动激光荧光DNA测序——第一代测序技术 第三节 其他DNA序列分析新技术第四章 基因突变技术 第一节 体外基因突变和鉴定 第二节 细胞和动物的基因诱变和鉴定第五章 核酸分子杂交 第一节 核酸探针及其标记 第二节 Southem印迹杂交 第三节 Northem印迹杂交 第四节 其他核酸分子杂交第六章 外源基因在原核细胞的表达 第一节 常用表达系统及其选择 第二节 外源基因的表达和鉴定 第三节 外源基因表达条件和优化 第四节 外源基因原核表达的基本操作第七章 外源基因在真核细胞中的表达 第一节 真核表达载体及宿主 第二节 真核细胞基因导入方法 第三节 外源基因在酵母细胞中的表达 第四节 外源基因在昆虫细胞中的表达 第五节 外源基因在哺乳动物细胞中的表达第八章 蛋白质的分离纯化 第一节 蛋白质分离纯化的基本原则 第二节 生物样品的预处理 第三节 蛋白质样品的粗分离 第四节 蛋白质的层析纯化 第五节 蛋白质的电泳分离和鉴定 第六节 纯化蛋白质的后期处理 第七节 蛋白质分离纯化的综合策略第九章 蛋白质的定性定量分析 第一节 蛋白质分子量的测定 第二节 蛋门质的等电点测定 第三节 蛋白质总含量测定 第四节 特定蛋白质的含量测定 第五节 蛋白质半衰期测定第十章 蛋白的化学修饰分析 第一节 蛋白磷酸化分析 第二节 蛋白糖基化分析 第三节 其他蛋白共价修饰分析第十一章 蛋白质的空间结构分析 第一节 蛋白质的一级结构分析 第二节 蛋白质的二级结构分析 第三节 蛋白质的晶体空间结构解析 第四节 蛋白质的液相空间结构解析 第五节 蛋白质空间结构的预测 第六节 蛋白质的分子结构对接第十二章 蛋白质相互作用研究技术 第一节 酵母双杂交法 第二节 标签融合蛋白结合实验 第三节 免疫共沉淀分析 第四节 物理学方法研究蛋白-蛋白相互作用 第五节 蛋白-蛋白相互作用预测方法第十三章 蛋白质组学研究相关技术 第一节 蛋白质组双向凝胶电泳-质谱研究技术 第二节 基于多维层析质谱的蛋白质组研究策略 第三节 定量蛋白质组学研究技术第十四章 基因表达谱分析 第一节 基因表达谱分析的基本方法 第二节 基因芯片的原理及应用 第三节 基因芯片的数据挖掘 第四节 蛋白质芯片的原理及应用第十五章 基因转录调控分析 第一节 转录调节蛋白与DNA的结合分析 第二节 启动子转录活性分析 第三节 DNA甲基化分析 第四节 芯片技术在基因表达调控研究中的应用第十六章 非编码RNA研究策略与方法 第一节 miRNA的研究策略及相关技术 第二节 siRNA的设计与应用第十七章 疾病相关基因的鉴定和分析 第一节 鉴定和分析疾病相关基因的策略 第二节 基因分型 第三节 突变基因的检测第十八章 遗传修饰动物 第一节 小鼠实验的一般要求 第二节 转基因小鼠 第三节 基因剔除小鼠第十九章 基因功能的研究策略 第一节 从分子水平研究基因产物的功能特点 第二节 从细胞水平研究基因产物的作用机制 第三节 从整体水平研究基因产物的牛物学效应附录 附录Ⅰ分子生物学实验设计中的常见错误 附录Ⅱ分子生物学实验微量操作技巧 附录Ⅲ分子生物学实验教学实施方案 附录Ⅳ分子生物学实验资料参考英中文名词对照索引