组织化学与免疫组织化学
作者:李和 等主编
出版时间:2008年版
内容简介
随着医学研究生培养规模的不断壮大,国内研究生培养硬件及软件水平的相对落后与培养高素质研究生之间的矛盾日益突出,如何解决这一矛盾成为我们国家医学研究生培养迫切需要解决的问题。本教材是在卫生部全国高等院校医学研究生教材建设研究会组织领导下,为临床医学、基础医学、预防医学、药学和护理等专业的硕士生、博士生及相应的医药工作者而编写的。它以实用、简明、理论与实践紧密结合为特点,以培养研究生基本实验技能、提高科研能力和启发创新为目的,力争在研究生培养中起导航作用。主要内容包括:组织化学与免疫组织化学染色样品制备;免疫组织化学技术;原位杂交组织化学;显微摄影技术等。
目录
第一章 绪论
第一节 组织化学发展的基础
一、细胞生物学发展与组织化学
二、生物化学发展与组织化学
三、免疫学发展与组织化学
四、分子生物学发展与组织化学
第二节 组织化学发展简史
一、组织化学的兴起
二、现代组织化学的发展
三、我国组织化学发展概况
第三节 组织化学技术基本要求
一、组织化学的分支和分类
二、组织化学技术的基本要求
第二章 组织化学与免疫组织化学染色样品制备
第一节 取材
一、组织标本取材
二、细胞标本取材
(一)培养细胞
(二)涂片法
第二节 固定
一、组织和细胞的固定方法
(一)浸润法
(二)灌流固定法
二、常用固定剂和固定方法
(一)组织常用固定剂和固定方法
(二)培养细胞常用固定剂和固定方法
第三节 包埋和切片
一、石蜡包埋
(一)包埋前脱水
(二)透明
(三)浸蜡
(四)包埋
(五)修块
二、切片
(一)石蜡切片
(二)冰冻切片
(三)振动切片
三、防脱片处理步骤
(一)载玻片和盖玻片的处理
(二)黏附剂的使用
(三)免疫组织化学染色中常见脱片原因科学史话
——幽门螺杆菌与胃溃疡
第三章 组织化学
第一节 核酸组织化学
一、Feulgen反应
(一)原理
(二)Schiff液的配制
(三)Feulgen反应步骤
二、吖啶橙染色
(一)吖啶橙区分活细胞DNA和RNA的荧光组织化学染色法
(二)吖啶橙原位区分组织细胞DNA和RNA的荧光组织化学染色法
三、Hoechst33258染色
四、DAPI染色
五、溴化乙啶和碘化丙啶染色法
(一)溴化乙啶染色
(二)碘化丙啶染色
第二节 脂类组织化学
一、乙醇苏丹黑B染色法
(一)染色程序
(二)注意事项
二、油红O染色法
(一)油红O染液的配制
(二)染色程序
第三节 酶组织化学
一、酶组织化学的基本原理及一般原则
(一)酶组织化学的基本原理
(二)酶显示方法
(三)酶组织化学对组织处理的基本要求
二、常用酶组织化学染色方法
(一)磷酸酶
(二)三磷酸腺苷酶
(三)羧酸酯水解酶
(四)氧化酶和脱氢酶
(五)一氧化氮合酶
第四节 凝集素组织化学
一、凝集素的标记物
二、染色程序
(一)FITC标记凝集素的组织化学染色程序
(二)辣根过氧化物酶标记凝集素的组织化学染色程序
(三)生物素标记凝集素的组织化学染色程序
第五节 荧光组织化学
一、组织细胞荧光分类
(一)自发荧光
(二)诱发荧光
(三)酶促荧光
(四)荧光染色
(五)免疫荧光
二、生物胺荧光组织化学
(一)FalckHillarp甲醛诱发荧光法
(二)乙醛酸诱发生物单胺荧光法
(三)邻苯二醛显示组胺荧光法科学史话——周期蛋白的发现
第四章 免疫组织化学技术
第一节 免疫组织化学基本原理
一、直接法
二、间接法
三、亲和免疫组织化学
(一)亲和素一生物素一过氧化物酶复合物法
(二)链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶法
第二节 免疫组织化学染色步骤
一、SABC法免疫组织化学染色步骤
(一)石蜡切片免疫组织化学染色
(二)冰冻切片免疫组织化学染色
(三)培养细胞免疫细胞化学染色
二、SABC法与其他免疫组织化学染色方法比较
(一)SP法或SAP法
(二)EnVisionTMSystems
(三)MaxVision法
三、免疫组织化学染色结果评价
(一)以抗原表达模式定位
(二)阳性染色结果定量
四、讨论
(一)实验计划
(二)抗体的稀释度
(三)滴加抗体注意事项
(四)抗体的保存
(五)对照实验
(六)免疫组织化学技术应用的基本原则
(七)疑难问题剖析
第三节 免疫组织化学双重染色
第四节 免疫荧光组织化学技术
一、荧光的基本知识
(一)荧光
(二)荧光物质的特性和种类
二、免疫荧光组织化学基本原理及方法
(一)基本原理
(二)基本方法
三、免疫荧光组织化学染色步骤
(一)直接法
(二)间接法
(三)SABGCy3法
(四)双重染色法
(五)膜抗原荧光抗体染色法
(六)补体法
(七)荧光抗体再染色法
四、非特异性荧光染色的消除
五、生物荧光显微镜
(一)荧光显微镜的分类及主要组成
(二)荧光显微镜的基本操作及注意事项
六、激光扫描共聚焦显微镜
(一)激光扫描共聚焦显微镜基本原理
第五章 原们杂交组织化学
第六章 电镜组织化学与免疫电镜技术
第七章 组织化学与免疫组织化学定量分析技术
第八章 显微摄影技术
第九章 组织化学与免疫组织化学实验指导
附录一 免疫组织化学染色常用试剂配制
附录二 原位杂交试剂配制