现代生物医学科研技术丛书 形态学实验技术
作者: 赵荧,唐军民 著
出版时间: 2008年版
丛编项: 现代生物医学科研技术丛书
内容简介
有位前辈曾说过:一名合格的实验技术人员应具备听、说、读、写、思五项能力。听,听他人的实验思路、实践经验,以充实自身的实验设计;说,多与他人交流,在交流中捕捉灵感,丰满与纠正实验过程;读,博览全书,阅读文献著作,积累素材,优选实验方案;写,手要勤,随时记录实验感受与疑惑,寻找解决疑惑的途径;思,则最为重要,实验中存在一些不确定性因素,勤于思考,设计严谨周密的实验技术路线,随时调整实验流程与操作。在当今生物学和医学领域中,由于新技术、新方法的层出不穷、日益更新,以及各个专业间的相互渗透与融合,这就要求实验技术人员不仅要熟知本专业的实验技术与方法,同时还应了解与熟悉其他与本专业相关的实验技术内容。实验技术的实质是实践经验积累与沉淀的过程,多次循环往复,不单单是实验技术熟练的过程,更是熟能生巧、巧中生新的过程。如Masson三色染色(Masson P,1929)经历了许多实验者不断摸索、改良与优化,以及各自对染色的理解与需求,使其在获得准确的染色结果前提下得到了技术上的提高,这就是一些传统技术方法一直能沿用至今的缘故。新技术、新方法应用的同时,传统实验技术也不应被忽略、放弃。为了能使更多的实验人员全面地了解形态学石蜡切片技术的相关内容,为了给以形态学改变为依托的研究课题提供实验原理、实验操作及注意事项等相应的信息,同时也是为了对过去所积累的实践经验进行梳理总结,十位不同院校的编者共同努力完成了本书的编写。本书以实用性、稳定性、可操作性为编写宗旨。实用性是从使用者的角度,依据编者的实践经验总结和国内外实验技术的发展,去选择与编排实验技术方法与流程等,通过石蜡切片、苏木精一伊红染色、特殊染色以及免疫组织化学和原位杂交技术的介绍,使读者对石蜡切片技术有一个全面的了解,也为相关形态学技术的学习奠定基础。稳定性是指所选用的实验技术结果的稳定性,对于初学者而言,实验操作及实验结果呈现的可重复性尤为重要。而可操作性则是指从初学者的实际出发,对每项实验技术力求介绍其原理、具体实验操作及实验注意事项等,通俗易懂且操作性强,以期起到实验指南的作用。
目录
引言
第1章 形态学制片种类
一、非切片制作方法
二、组织切片制作方法
第2章 组织学石蜡切片制作技术
第1节 标本取材
一、实验动物的处死方法
二、不同组织器官的取材方法
三、取材注意事项
附:大鼠胸、腹腔脏器的取材方法
第2节 标本固定
一、固定的目的和作用
二、固定的方式
三、影响固定作用的因素
四、固定后的标本修整
五、固定后的标本冲洗
六、固定容器
七、常用固定剂的性质及应用
第3节 标本处理过程:脱水、透明、浸蜡、包埋
一、脱水
二、透明
三、浸蜡
四、包埋
第4节 石蜡切片
一、石蜡切片机与切片刀
二、石蜡切片技术
第5节 染色与染料
一、染色与生物染料
二、染色作用的原理
三、染色方法
四、媒染剂和促染剂
五、染色形式
第6节 苏木精伊红染色
一、苏木精
二、伊红
三、石蜡切片苏木精伊红染色
第7节 封固
一、封固的目的
二、封固剂种类
三、封固剂的折光率
四、常规石蜡切片封固方法
第3章 特殊染色技术
第1节 胶原纤维染色
一、形态结构与特点
二、胶原纤维染色
三、磷钼酸和(或)磷钨酸在染色中的作用
四、影响结缔组织三色染色的因素
附:苦味酸天狼猩红染色显示胶原纤维
第2节 弹性纤维染色
一、形态结构与特点
二、弹性纤维染色
第3节 网状纤维染色
一、形态结构与特点
二、网状纤维铵银技术的基本步骤与作用
三、常用的铵银方法
四、网状纤维铵银方法的基本要求
第4节 肥大细胞染色
一、形态结构与特点
二、肥大细胞染色
三、异染性
第5节 胰岛细胞染色
一、胰岛细胞形态特点
二、胰岛细胞染色
第6节 糖原染色
一、显示糖原的高碘酸雪夫(PAS)反应
二、Best卡红染色显示肝糖原
第7节 细胞内DNA和RNA染色
一、Feulgen反应显示DNA
二、甲绿-派若宁染色显示DNA和RNA
第8节 肌组织染色
一、Heidenhain铁苏木精染色
二、Mallory磷钨酸苏木精(PTAH)染色
第9节 神经元(细胞)尼氏体染色
一、焦油紫染色
二、甲苯胺蓝染色
三、硫堇染色
四、Luxol坚牢蓝-焦油紫染色
第4章 免疫组织(细胞)化学技术
第1节 免疫组织(细胞)化学相关的基本概念?
一、抗原
二、抗体
第2节 免疫组织(细胞)化学基本类型与原理
一、免疫组织(细胞)化学直接法
二、免疫组织(细胞)化学间接法
三、非标记抗体法
四、抗生物素生物素法
第3节 免疫组织(细胞)化学技术的种类
第4节 免疫组织(细胞)化学技术的基本过程
第5节 免疫组织(细胞)化学石蜡切片的有关基本技术
一、用于免疫组织(细胞)化学的标本取材
二、用于免疫组织(细胞)化学的标本固定
三、用于免疫组织(细胞)化学的标本处理过程:脱水、透明、浸蜡、包埋
四、用于免疫组织(细胞)化学石蜡切片的制作
五、常用的免疫组织(细胞)化学方法
六、免疫组织(细胞)化学染色主要步骤及注意事项
七、血清封闭排除非特异性着色
八、减少或消除内源性生物素
九、抗体
十、显色
十、检测系统
十二、免疫组织(细胞)化学复染
十三、孵育盒的作用?
十四、封固剂的使用
十五、免疫组织(细胞)化学结果与非特异染色的控制
十六、常见的免疫组织(细胞)化学问题
第6节 双重免疫组织(细胞)化学技术
一、双重免疫标记染色种类
二、常用的双重免疫标记配伍类型
三、双重免疫组织(细胞)化学的基本种类
四、常用的双重免疫组织(细胞)化学染色方法
五、消除双重免疫组织(细胞)化学染色间抗体系统的
交叉反应
附:常用的酸性溶液洗脱方法与应用
六、双重免疫组织(细胞)化学注意事项
第5章 原位核酸分子杂交
第1节 原位核酸分子杂交的基础知识
一、核酸的化学组成
二、DNA和RNA
三、DNA变性与复性
第2节 原位分子杂交的基本原理
一、基本原理
二、探针类型与制备
三、探针标记物与探针标记方法
第3节 原位核酸分子杂交技术的基本步骤与原理
一、杂交前准备
二、杂交预处理
三、杂交反应
四、杂交后处理
五、杂交体的检测
第4节 对照实验和实验中的问题与对策
一、对照实验
二、实验中的问题与对策
第6章 形态学技术实验指导
第7章 附录